siRNA干擾MagT1對(duì)原代大鼠心肌細(xì)胞影響的初步研究.pdf

1、MagT1,是一種特異性通道樣Mg2+轉(zhuǎn)運(yùn)體,含有335個(gè)氨基酸,分子量為38KDa。它含有4個(gè)跨膜區(qū)域,N末端和C末端都在細(xì)胞外。MagT1在哺乳動(dòng)物的各組織和器官中有廣泛表達(dá),可能與Mg2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞有關(guān)。Mg2+是一種對(duì)心肌細(xì)胞生命活動(dòng)有重要影響的二價(jià)陽(yáng)離子,特別是對(duì)心肌細(xì)胞的離子通道。臨床觀察表明,當(dāng)心肌細(xì)胞內(nèi)游離Mg2+濃度低于生理水平(0.4-1.0mM)時(shí),會(huì)導(dǎo)致心律失常等癥狀。
　　 本研究發(fā)現(xiàn),MagT1在大鼠

2、和小鼠心肌細(xì)胞均有較高的表達(dá)。在各個(gè)發(fā)育時(shí)期的大鼠心肌細(xì)胞中,MagT1表達(dá)水平呈相對(duì)穩(wěn)定,說(shuō)明MagT1可能在維持心肌細(xì)胞Mg2+內(nèi)穩(wěn)態(tài)過(guò)程中起重要的作用。我們應(yīng)用siRNA下調(diào)大鼠心肌細(xì)胞中的MagT1后觀察到心肌細(xì)胞內(nèi)Mg2+濃度出現(xiàn)明顯下降,其中48h下降了24％(p<0.05),60h下降了36％(p<0.01)。伴隨著心肌細(xì)胞Mg2+濃度的下降,心肌細(xì)胞還出現(xiàn)了凋亡,siRNA下調(diào)MagT148h和60h后:細(xì)胞凋亡率分別達(dá)

3、到31.2％(p<0.01)和40.6％(p<0.01),比對(duì)照細(xì)胞有顯著提高。我們?cè)谡{(diào)查凋亡的信號(hào)通路時(shí)發(fā)現(xiàn),凋亡細(xì)胞的線(xiàn)粒體膜電位顯著降低,其中48h下降了21％(p<0.05),60h下降了30％(p<0.01)。而caspase-9活性則在60h后有顯著提高。這說(shuō)明線(xiàn)粒體介導(dǎo)的信號(hào)通路參與了心肌細(xì)胞凋亡。另外,我們把心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中的Mg2+濃度由1mM增加為10mM時(shí),細(xì)胞的凋亡率會(huì)顯著降低,其中48h下降了8.4％(p<0.