孕哺期暴露鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯對(duì)仔鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元樹突形態(tài)發(fā)育的影響.pdf

1、目的:鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯(Di(2-ethylhexyl) phthalate，DEHP）是一種用于增加聚氯乙烯塑料的可塑性和耐用性的人工合成化學(xué)物，廣泛用于建筑業(yè)，汽車產(chǎn)品，美容用品，香水，食品包裝袋，兒童產(chǎn)品和醫(yī)療設(shè)備。婦女妊娠期和哺乳期是嬰幼兒神經(jīng)發(fā)育的關(guān)鍵窗口期，流行病學(xué)研究表明孕婦圍生期暴露DEHP會(huì)導(dǎo)致兒童大腦功能異常。大腦海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)，海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元的樹突調(diào)控神經(jīng)信號(hào)的整合和傳導(dǎo)。海馬CA1區(qū)

2、錐體神經(jīng)元樹突的萎縮會(huì)導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙。目前，母體孕期和哺乳期暴露DEHP是否影響仔鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元樹突的發(fā)育尚不明確，其相關(guān)機(jī)制也有待研究。本研究通過建立母鼠孕期和哺乳期暴露DEHP的模型，探索孕期和哺乳期暴露DEHP是否會(huì)影響仔鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元樹突的發(fā)育，并探明是否通過JNK1介導(dǎo)MAP2和stathmin的生物水平紊亂的作用機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法:將已孕的雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為四組:0 mg/kg/day

3、組、30 mg/kg/day組、300 mg/kg/day組和750 mg/kg/day組，各劑量組以相應(yīng)的濃度的DEHP玉米油溶液進(jìn)行灌胃。在仔鼠PN7、PN14和PN21時(shí)，取仔鼠大腦Golgi-Cox染色觀察海馬CA1區(qū)樹突發(fā)育，并用western blot和免疫熒光法檢測(cè)樹突發(fā)育相關(guān)蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:1、通過海馬CA1區(qū)樹突Golgi-Cox染色觀察，在PN7、PN14和PN21，與對(duì)照組相比，暴露組雄性仔鼠海馬CA1

4、區(qū)錐體神經(jīng)元基樹突分支總長(zhǎng)度和基樹突分支與同心圓的交點(diǎn)數(shù)顯著下降(p＜0.05)，而暴露組雌性仔鼠沒有顯著改變(p＞0.05);在各時(shí)間點(diǎn)，所有性別，所有暴露組和對(duì)照組相比，頂樹突總長(zhǎng)度都沒有顯著差異(p＞0.05);在所有時(shí)間點(diǎn)，各個(gè)暴露組雄性仔鼠與對(duì)照組相比，頂樹突分支與同心圓的交點(diǎn)數(shù)只在PN7顯著下降(p＜0.05)，各個(gè)暴露組雌性仔鼠沒有顯著性變化。2、通過western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白發(fā)現(xiàn)在PN7、PN14和PN21時(shí)，

5、300mg/kg/day組和750 mg/kg/day組雄性仔鼠海馬MAP2、p-MAP2、p-stathmin、p-JNK1蛋白表達(dá)與對(duì)照組相比顯著下降(p＜0.05)，stathmin蛋白表達(dá)顯著上升;在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，與對(duì)照組相比，30 mg/kg/day組雄性仔鼠海馬MAP2、p-MAP2、p-JNK1蛋白表達(dá)降低，但MAP2只在PN7顯著下降(p＜0.05)，p-MAP2只在PN21下降具有顯著性改變(p＜0.05)，p-JNK1

6、在PN14和PN21下降具有顯著性(p＜0.05)，stathmin蛋白表達(dá)與對(duì)照組相比上升，但在PN7和PN21上升有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。對(duì)于雌性仔鼠，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，各個(gè)暴露組海馬相關(guān)蛋白表達(dá)與對(duì)照組相比都沒有顯著性改變。3.通過免疫熒光檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在所有時(shí)間點(diǎn)，與對(duì)照組比較，各個(gè)暴露組雄性仔鼠海馬CA1區(qū)p-MAP2、p-stathmin表達(dá)下降，除30 mg/kg/day組在PN7時(shí)p-MAP2、p-stathmin表達(dá)下降