邯鄲市2009~2011年手足口病流行特征及腸道病毒71型VP1區(qū)基因特征分析.pdf

1、目的：
　　1通過對邯鄲市2009～2011年手足口病(HFMD)的流行病學(xué)特征的分析，明確HFMD的流行規(guī)律，為HFMD的預(yù)防控制措施和策略的制定提供科學(xué)依據(jù)。
　　2明確邯鄲市2009～2011年EV71流行株的基因型別及其與其他地區(qū)EV71流行株的關(guān)系，探索其基因型的遺傳變異情況。
　　方法：
　　1通過中國疾病監(jiān)測信息系統(tǒng)，收集2009～2011年邯鄲市報告的HFMD病例信息，通過SPSS13.0分析比較

2、三年中HFMD病例的三間分布。
　　2采集HFMD病例的臨床標(biāo)本，針對腸道病毒(EV)5’端非編碼區(qū)保守基因序列以及EV71 VP1區(qū)基因序列設(shè)計EV通用引物、EV71型和CoxA16型特異引物，進行熒光定量PCR檢測。
　　3將檢測為EV71陽性的HFMD實驗室診斷病例標(biāo)本分年度按采集時間編號，隨機抽取接種RD細胞進行病毒分離培養(yǎng)。
　　4設(shè)計并合成針對EV71型VP1基因片段的引物，對經(jīng)檢測EV71核酸陽性的培養(yǎng)物

3、進行RT-PCR擴增，并測定其序列，用DNASTAR軟件進行核苷酸和氨基酸序列同源性分析，構(gòu)建系統(tǒng)進化樹，對邯鄲市2009～2011年EV71流行株基因亞型進行分析。
　　結(jié)果：
　　1流行強度。2009～2011年邯鄲市HFMD發(fā)病率為218.01/10萬、122.54/10萬，和34.90/10萬呈連續(xù)下降趨勢。
　　2時間分布。2009年HFMD疫情發(fā)生時間早且上升快，來勢猛，下降快，無拖尾；2010年HFMD疫

4、情上升比2009年延后兩周，疫情上升趨勢緩慢，達高峰后，與2009年流行曲線重合略低，下降緩慢，32周后高于2009年同期水平，有明顯的拖尾現(xiàn)象；2011年有兩個發(fā)病高峰，一個在春末夏初，與前兩年高峰基本一致，另一個出現(xiàn)在冬季，有冬季小高峰或翹尾現(xiàn)象。
　　3地區(qū)分布
　　2009～2011年邯鄲市19個縣市、區(qū))均有病例報告，但發(fā)病率區(qū)域間差異很大，且高發(fā)和低發(fā)縣區(qū)相對固定。三年中發(fā)病率均較低的縣區(qū)有峰峰礦區(qū)、邱縣和魏縣，

5、發(fā)病率均較高的是邯山區(qū)、邯鄲縣和曲周縣。
　　4人群分布
　　2009～2011年邯鄲市HFMD男女性別比例在1.6％～1.73之間，男性病例多于女性病例(P<0.05)；發(fā)病主要集中于0～3歲兒童，占所有發(fā)病數(shù)的86.06％，從2009年到2011年邯鄲市HFMD0～3歲兒童比例依次為：83.62％，88.62％和92.07％，高發(fā)年齡有向小年齡組集中的趨勢；散居兒童發(fā)病構(gòu)成呈上升趨勢，而幼托兒童和學(xué)生呈下降趨勢。

6、　　5病原學(xué)檢測結(jié)果2009～2011年共檢測1267例HFMD標(biāo)本，陽性896例，陽性率為70.72％。陽性標(biāo)本中，EV71、CoxA16和其他腸道病毒的構(gòu)成分別為65.51％、15.63％和18.86％。EV71、CoxA16和其它腸道病毒在各年的構(gòu)成比例不一致(X2=106.063，P<0.001)，但均以EV71為主。
　　6 EV71的VP1區(qū)基因特征分析邯鄲市13株EV71代表株之間VP1區(qū)核苷酸同源性在96.4％～1

7、00％之間，與臺灣分離株VP1區(qū)同源性為92.4％～93.2％，與2008年阜陽、2009年河南、2010年河北、2010年云南和2011年陜西分離的EV71代表株核苷酸同源性在96.6％～99.1％之間，與A、B基因型代表株VP1區(qū)同源性差異較大，在82.0％～82.7％與83.6％～84.5％之間。已知基因型C1、C2、C3、C4代表株的同源性分別在89.8％～90.3％、89.3％～90.O％、87.9％～88.7％和96.0％～

8、96.9％之間?；赩P1區(qū)構(gòu)建的EV71系統(tǒng)進化樹顯示，這13株邯鄲市分離到的EV71毒株均為C4a亞型。
　　結(jié)論：
　　1邯鄲市2008～2010年連續(xù)三年HFMD呈高流行狀態(tài)，2009年為發(fā)病高峰年，2011年轉(zhuǎn)入低流行狀態(tài)。HFMD發(fā)病具有區(qū)域特征。
　　2不同年份HFMD流行曲線有所不同，2009年和2010年春夏高峰明顯。2009年HFMD疫情上升迅猛，下降快，無拖尾現(xiàn)象；2010年疫情上升平緩，下降緩慢

9、，有拖尾現(xiàn)象；2011年呈現(xiàn)兩個發(fā)病小高峰，一個在春末夏初，一個在冬季。
　　3 HFMD發(fā)病男性兒童高于女性兒童，以3歲以下散居兒童為主，發(fā)病年齡近年有向低年齡集中的趨勢。
　　4邯鄲市2009～2011年HFMD的病原譜構(gòu)成不同，CoxA16和EV71及其它型別致HFMD腸道病毒交替變化，但仍主要以EV71為主。
　　5 EV71毒株VP1基因分型及系統(tǒng)進化樹分析表明，邯鄲市2009～2011年EV71流行株為C4