脂肪酶的固定化及生物合成L-抗壞血酸酯的研究.pdf

1、L-抗壞血酸脂肪酸酯由L-抗壞血酸經(jīng)酯化或轉(zhuǎn)酯反應(yīng)改性而成，具備良好的穩(wěn)定性和抗氧化能力，是一種常用的食品添加劑。L-抗壞血酸衍生物的合成方法有化學(xué)法和酶法。隨著社會的發(fā)展和人們環(huán)保意識的提高，酶法合成越來越受到人們的重視，然而游離脂肪酶操作穩(wěn)定性差，易失活，難于回收重復(fù)利用，單次使用成本高等缺點，限制了酶法生產(chǎn)的應(yīng)用。為解決這一問題，酶固定化技術(shù)應(yīng)運而生。如何通過固定化技術(shù)提高酶的操作穩(wěn)定性激起了廣大學(xué)者的研究興趣。
　　本文分

2、為三部分。第一部分利用懸浮聚合法，在異辛烷存在/不存在的情況下制備了粒徑不同的聚（乙酸乙烯酯-丙烯酰胺）高分子微球，并以此高分子微球為載體，用物理吸附法對Candidarugosalipase進(jìn)行固定化，考察了載體表面親疏水特性和空間位阻對脂肪酶固定化效果的影響。結(jié)果表明，脂肪酶的固定化率和固定化酶活性與載體表面親疏水性密切相關(guān)，當(dāng)微球表面的疏水單體VAC占86%時，脂肪酶的固定化率和固定化酶活性最高，分別為達(dá)92%和598U/g載體；

3、當(dāng)載體上固載的酶過量時，酶分子易受到空間位阻的作用，致使固定化酶活性急劇下降。當(dāng)酶/載體比例為1:25時，固定化酶的比活最高，達(dá)4.65U/mg，比游離酶（3.0U/mg）活性還要高。
　　第二部分以乙酸乙烯酯、丙烯酰胺、丙烯酸為單體，自制Fe3O4為磁核，通過懸浮聚合法制備了聚（乙酸乙烯酯-丙烯酰胺-丙烯酸）磁性高分子微球，并以此磁性微球為載體固定化Candidarugosalipase，研究了微球表面的親疏水性對脂肪酶固定化率