RST抗腫瘤活性成分篩選及其脂質(zhì)體研究.pdf

1、RST總提取物具有抗心律失常、抗腫瘤、免疫抑制、抗氧化和鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、解熱降溫等中樞抑制性作用。近幾年關(guān)于RST提取液對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有抑制作用而對(duì)正常細(xì)胞無毒副作用的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道越來越多，然而對(duì)于RST提取液抗腫瘤的活性成分報(bào)道很少。
　　 本課題組在前期工作中首次構(gòu)建了TrkA脂筏.硅膠固定相色譜系統(tǒng)，固定相能與酪氨酸激酶受體為靶點(diǎn)的藥物特異性結(jié)合產(chǎn)生保留，而非酪氨酸激酶靶點(diǎn)藥物在該TrkA脂筏色譜柱中無保留行為，因此可以用于以T

2、rkA受體為靶標(biāo)的先導(dǎo)藥物篩選研究。前期研究發(fā)現(xiàn)RST提取液在脂筏色譜上有特異性的保留，推測(cè)RST提取液含有相關(guān)的抗腫瘤活性成分。
　　 本研究以MTT法為篩選指標(biāo)，以U251為受試細(xì)胞，因?yàn)槠浼?xì)胞內(nèi)富含TrkA。采用體外抗腫瘤活性跟蹤與化學(xué)分離相結(jié)合的方法，確定了RST的部分抗腫瘤活性成分，并對(duì)活性成分進(jìn)行了脂質(zhì)體的制劑研究。
　　 采用80％乙醇對(duì)RST藥材進(jìn)行提取，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取，得到不同部

3、位萃取物，抗腫瘤活性測(cè)定顯示:石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、剩余水溶性部位均有一定的抗腫瘤作用，其中乙酸乙酯部位的抗腫瘤作用最好，因此確定RST提取物的乙酸乙酯萃取層為抗腫瘤活性部位，同時(shí)這樣的結(jié)果也驗(yàn)證了脂筏色譜對(duì)于RST提取液的活性篩選結(jié)果的可靠的。
　　 取RST水提取液的乙酸乙酯萃取層進(jìn)行分離、純化。從活性部位中分離得到3個(gè)化合物，經(jīng)理化性質(zhì)和核磁共振譜圖分析，分別鑒定為:肉豆蔻烯酸乙酯、肉豆蔻烯酸、山槐素，其中肉豆蔻烯酸乙

4、酯、肉豆蔻烯酸為首次從RST中分離得到。采用MTT法對(duì)以上3個(gè)化合物進(jìn)行抗腫瘤活性驗(yàn)證。結(jié)果表明三個(gè)化合物都對(duì)U251腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，其中山槐素的抑制效果最強(qiáng)。
　　 通過以上研究發(fā)現(xiàn)，MCC具有明顯的抗腫瘤作用，但其水溶性低，生物利用度低，針對(duì)這樣的問題將其制備成脂質(zhì)體。采用薄膜分散法制備脂質(zhì)體，超濾法測(cè)定脂質(zhì)體包封率，以包封率、載藥量為指標(biāo)，利用星點(diǎn)設(shè)計(jì)優(yōu)化了處方及工藝。根據(jù)優(yōu)化處方工藝制得脂質(zhì)體的包封率為(83.95