CP抗腫瘤活性成分篩選及其納米制劑研究.pdf

1、第一部分：綜述
　　 本章綜述了近年來國內(nèi)外對CP的化學(xué)成分及其藥理活性的研究進(jìn)展，總結(jié)與歸納了中藥新劑型的研發(fā)思路和方法，并展望了抗腫瘤中藥納米劑型的發(fā)展前景。隨著納米技術(shù)和新型納米材料的飛速發(fā)展，納米劑型將成為今后抗腫瘤中藥劑型研究的重要方向。
　　 第二部分：CP抗腫瘤活性部位的篩選
　　 本課題組在前期研究中建立了篩選中藥抗腫瘤活性部位的脂筏色譜模型，通過對CP的脂筏色譜篩選，發(fā)現(xiàn)其水提液具有較強(qiáng)的保留行

2、為，初步判定其具有抗腫瘤活性。
　　 本部分以水提取CP，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取水提液，通過硅膠柱層析及大孔樹脂分離各部位，得到流分Frl～Fr17，以MTT法測定各流分得體外抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)Frl1流分作用于人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株72h后的抑制率最高為77.34％，其抑制U251生長的作用與5-氟尿嘧啶相近，F(xiàn)r3流分作用于U251細(xì)胞株72h后的抑制率最高達(dá)到60.53％;以上表明乙酸乙酯萃取部位的Fr3流分和正丁醇

3、萃取部位的Frl1流分具有較好的抗腫瘤活性。
　　 第三部分：CP抗腫瘤活性部位的活性成分研究
　　 本部分采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器法分析抗腫瘤活性流分Frl1的化學(xué)成分，并使用半制備液相色譜法分離Frl1的主要化學(xué)成分;然后以MTT法評價其體外抗腫瘤活性;實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CPP為Frl1的主要化學(xué)成分，可有效抑制U251腫瘤細(xì)胞增殖，作用72h后，抑制率最高為71.38％，且呈濃度依賴性，并在TrkA-脂筏色譜

4、柱上有保留行為，說明其抗腫瘤作用靶點(diǎn)可能為酪氨酸激酶受體，該化合物有望發(fā)展成為一種新型酪氨酸蛋白激酶抑制劑。
　　 第四部分：CPP脂質(zhì)體包封率測定方法的建立及制備
　　 本部分建立了高效液相一超濾法測定CPP脂質(zhì)體包封率的方法，該方法線性關(guān)系、回收率及日間、日內(nèi)精密度均較好;同時以包封率為指標(biāo)，評價了CPP脂質(zhì)體的三種制備方法;實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，包封率大小順序?yàn)槟嫦嗾舭l(fā)法、復(fù)乳法、薄膜-超聲法，因此最終采用了逆相蒸發(fā)法制備

5、CPP脂質(zhì)體。
　　 第五部分：CPP脂質(zhì)體逆相蒸發(fā)法制備工藝的優(yōu)化
　　 本部分首先考察各單一因素對逆相蒸發(fā)法的影響，選取了影響最顯著的三個因素（固醇與卵磷脂質(zhì)量比、藥液濃度、超聲功率），采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選處方，確定了最佳的制備工藝:藥液濃度為13.33mg·mL-1，膽固醇∶大豆磷脂質(zhì)量為1∶5，超聲功率為200W，該處方工藝測得平均包封率為74.52％。
　　 第六部分：CPP脂質(zhì)體的穩(wěn)定性考察及釋放機(jī)理