金花茶茶花黃酮類化合物的分離純化及抗氧化活性的初步研究.pdf

1、金花茶(Camellia chrysantha)是山茶科、山茶屬、金花茶組、金花茶系植物。金花茶是茶花家族中唯一花瓣為金黃色的珍稀物種，也是世界性的名貴觀賞植物。近年來隨著金花茶人工種植的增加，金花茶的應(yīng)用有待進(jìn)一步開發(fā)。金花茶茶花含有豐富的營養(yǎng)成分，但理論研究卻相當(dāng)缺乏，同時(shí)也沒得到很好的開發(fā)利用。研究表明金花茶茶花中含非常豐富的黃酮類化合物，同時(shí)大量研究也表明黃酮類化合物具有抗氧化、增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)、防癌、抗癌、抗衰老、抗疲勞、降血脂、

2、抗菌抑菌、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等作用，而且抗氧化作用是其他功能作用的理論基礎(chǔ)。為了對金花茶進(jìn)行進(jìn)一步的開發(fā)利用，本課題選擇以金花茶茶花為原料提取其中豐富的黃酮類化合物，并對茶花黃酮類化合物做進(jìn)一步的分離純化及抗氧化活性研究。
　　本研究采用超聲輔助提取法提取金花茶茶花中的黃酮類化合物，實(shí)驗(yàn)考察了料液比、乙醇濃度、提取溫度、提取頻率及提取次數(shù)對黃酮類化合物得率的影響。結(jié)果表明最適的提取條件為：溫度70℃、乙醇濃度20％、料液比1:45(

3、g/mL)、超聲功率300W、提取1次。在此工藝條件下黃酮類化合物得率高達(dá)13.7％。
　　利用乙醇分級沉淀法對超聲提取的黃酮類化合物進(jìn)行初處理，乙醇分級沉淀后黃酮類化合物、茶多糖、粗蛋白含量分別減少了7.8％、65.3％和29.3％，結(jié)果表明乙醇分級沉淀法能有效達(dá)到初分離目的。實(shí)驗(yàn)選擇大孔樹脂做進(jìn)一步的分離純化，以吸附率和解析率為考察因素，通過靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)從D101、XAD1600、XAD16、AB-8、DM130、S-8中選擇

4、了合適的大孔樹脂樹XAD1600。XAD1600大孔樹脂的靜態(tài)吸附率和解析率分別為35.8％和79.1％。通過靜態(tài)實(shí)驗(yàn)研究了樣液pH值、濃度、洗脫液乙醇濃度對分離純化的影響。在靜態(tài)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了動(dòng)態(tài)研究，結(jié)果表明最適純化條件為裝柱大孔樹脂徑高比1:8、吸附過程中上樣液pH=5.0、濃度1.6mg/mL、流速1.0mL/min，最適上樣液體積為660mL，洗脫液乙醇濃度為60％，洗脫率高達(dá)93.7％。實(shí)驗(yàn)對超聲提取液、乙醇沉淀后的黃酮

5、類化合物及大孔樹脂分離純化后的產(chǎn)品進(jìn)行了純度考察，純度分別為32.7％、40.7％和83.4％。茶花提取液經(jīng)分離純化后黃酮類化合物純度提高2.55倍。因此通過乙醇沉淀和XAD1600大孔樹脂處理能夠很好的分離純化茶花黃酮類化合物。
　　研究對吸附后的黃酮類化合物進(jìn)行梯度洗脫，洗脫后得到黃酮類化合物含量較多的三個(gè)組分YKC1、YKC2、YKC3，用Vc為對照通過對OH·、O2-·和DPPH自由基的清除力來考察各組分的抗氧化活性。結(jié)果