擬南芥LTP1的分子鑒定及其在乙烯信號轉導中的作用.pdf

1、MolecularidentificationandfunctionalSlgnanng●1●ThesissubmittedtolneSlSSUDmltteQtO咖缸D徹砒“厲亂紀廠訓7z劫P疵砂InFul伽mentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofScienceYueSun(CoUegeofLifeScience)Supervisor：profY_aIljunYiprofChunhaiDong

2、Qin酣aoCllinaJune2013青島農業(yè)大學碩士學位論文摘要擬南芥z冊的分子鑒定及其在乙烯信號轉導中的作用摘要乙烯作為激素會直接參與植物的生長發(fā)育、果實成熟及植物的抗逆境生理反應等，人們在研究乙烯受體的同時，對乙烯信號傳導途徑中的重要下游基因及其相應的調控因子也做了深入細致的研究，但是對此信號轉導途徑中的重要因子及其調控特別是乙烯受體的調控及新的調控因子和作用機理還遠遠沒有搞清楚。擬南芥的LTPII4蛋白(1ipid仃anSfe

3、rprotein)是么fJg秸巧DJ基因編碼的脂質轉運蛋白，是根據(jù)酵母雙雜交篩選I盯E1的互作蛋白得到的，我們叫做LTPl蛋白，屬于LTPII亞家族。“三重反應”初步分析發(fā)現(xiàn)助7突變體和過表達株系均對乙烯不敏感，因此我們推測LTPl蛋白參與植物乙烯反應。本研究主要是對三開_7進行分子鑒定并分析其在乙烯反應和信號轉導中的作用。主要研究結果如下：1突變體坳J及LTPlov過量表達轉基因植物的表型分析表明上即』基因可能參與對植物乙烯反應的調控

4、。2克隆了擬南芥L刀』的啟動子，應用酶切連接的方法構建了三“fjjGUS表達載體，GUS報告基因組織化學定位檢測發(fā)現(xiàn)三開『基因在種子萌發(fā)初期不表達，萌發(fā)4d后開始在根中表達，7d后在根、莖、葉中均有表達。3突變體幼J及LTPlov轉基因植物中乙烯信號傳導途徑相關基因表達分析表明LTPl對乙烯信號傳導通路有調控作黑：ETRi、ERSi、CTRl、EIN2、EIN3、ERFs等基因在坳_f突變體中表達量要高于野生型中表達量，而R您J基因的表

5、達沒有變化；ACC處理后E豫、劇峪f等基因表達量在切』突變體中要明顯高于野生型中的表達量，C豫J、劇加、?、?、ER乃表達量明顯在突變體中要低于野生型中的表達量。4運用Gatewav分子克隆技術構建了35S：：LTPlGFP過表達載體，并獲得了轉基因株系，LTPlGFP融合表達載體的亞細胞定位表明LTPl存在于細胞周圍，可能是一個分泌蛋白。5將坳『突變體和乙烯信號傳導途徑中的突變體作遺傳雜交，包括，紀，3，e護『，P驢J2，P護2J，8