楊梅疏果核仁中苦杏仁苷的提取純化及其功能活性評(píng)價(jià).pdf

1、楊梅疏果（Thinned bayberry）是由于楊梅果樹(shù)坐果率過(guò)高而采取的豐產(chǎn)措施，疏下來(lái)的果實(shí)通常被丟棄。楊梅疏果中的化學(xué)成分種類與成熟果實(shí)相當(dāng)，其果核中同時(shí)含有苦杏仁苷（Amygdalin）成分。目前對(duì)楊梅疏果核仁(Thinnedbayberry kernel，TBK)中苦杏仁苷的研究較少。本研究通過(guò)超聲波輔助提取法提取TBK中的苦杏仁苷，并對(duì)其體外抗氧化活性和止咳祛痰功能進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。研究結(jié)果如下:
　　(1)選取東魁、

2、荸薺、丁岙和晚稻四個(gè)不同品種楊梅的不同階段疏果的核仁為原料，測(cè)定TBK的物理化學(xué)性質(zhì)。結(jié)果顯示，隨著楊梅果實(shí)的成熟，核仁趨于飽滿，核仁占果核的比例不斷增加，最高達(dá)到8.76％。四個(gè)品種的TBK水分含量顯著下降(P＜0.05);粗脂肪和粗蛋白含量顯著增加(P＜0.05），總糖含量未呈現(xiàn)出規(guī)律性變化。這些TBK中水分、灰分、脂肪、蛋白質(zhì)和總糖的含量（以鮮重計(jì)）分別為30.16％-92.87％，0.53％-3.23％，0.54％-41.67％

3、，1.12％-20.67％和0.65％-3.38％。采用高效液相色譜法對(duì)各品種各階段TBK中的苦杏仁苷進(jìn)行含量分析，發(fā)現(xiàn)TBK中苦杏仁苷的含量隨著果實(shí)的成熟均顯著增加(P＜0.05)，其中以丁岙種第三階段疏果的苦杏仁苷含量最高，達(dá)到28.25mg/g（以鮮重計(jì)）。
　　(2)采用超聲波輔助溶劑提取法，對(duì)丁岙種楊梅第三階段疏果核仁中的苦杏仁苷進(jìn)行提取研究。在單因素和二水平試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以苦杏仁苷的提取率作為響應(yīng)值，響應(yīng)面優(yōu)化后的提取

4、參數(shù)為:乙醇濃度27％(V/V)，料液比為1∶45(W/V)，提取時(shí)間為20min，超聲溫度為44℃，超聲功率為250W，此時(shí)TBK苦杏仁苷的實(shí)際提取率為93.80％，得率為4.60％。
　　(3)本研究建立了TBK粗提液中苦杏仁苷的分離純化方法，得到最佳純化工藝為:以D101型大孔樹(shù)脂為吸附介質(zhì);上樣液中苦杏仁苷初始濃度為129-358mg/L，上樣流速2BV/h;洗脫液為3 BV的純水以及隨后的11BV的乙醇-水溶液(40∶6

5、0，v/v)，洗脫流速2BV/h。經(jīng)過(guò)一次D101型大孔吸附樹(shù)脂處理，產(chǎn)物的純度為82.00％±1.71，純度約增加了17倍，其平均回收率為77.94％±4.39。
　　(4)采用DPPH和ABTS抗氧化體系，考察TBK粗提物和精提物的抗氧化活性。發(fā)現(xiàn)TBK提取物對(duì)DPPH自由基和ABTS自由基具有良好的清除效果，且提取物濃度與清除率表現(xiàn)出較好的相關(guān)性。經(jīng)分析計(jì)算得到粗提物與精提物清除DPPH自由基的IC50值分別為1335mg/

6、L和261mg/L，清除ABTS自由基的IC50值分別為1447mg/L和281mg/L。TBK精提物較粗提物表現(xiàn)出了更好的體外抗氧化活性。
　　(5)通過(guò)小鼠止咳祛痰功能試驗(yàn)，得到TBK粗提物45、90、180mg/kg各劑量能夠不同程度地延長(zhǎng)氨水引咳小鼠的咳嗽潛伏期，減少2min內(nèi)的咳嗽次數(shù)，其中90mg/kg劑量組咳嗽潛伏期較對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(P＜0.05）。TBK粗提物各劑量組以及苦杏仁苷標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)小鼠氣管酚紅排泌量影響不顯著