獼猴桃根活性成分的提取、分離純化及其保肝功能評價的研究.pdf

1、獼猴桃(Kiwifruit)屬獼猴桃科,落葉木質藤本,在我國分布廣泛。獼猴桃的根或根皮含有多糖及苷類,萜類成分,鞣質,甾體、黃酮類等化學成分,具有健胃、清熱、解毒、利濕、祛風的作用。因此,對獼猴桃根重要活性成分進行提取分離純化工藝的研究以及對各提取物進行保肝功能的評價具有十分重要的意義。
　　 本文以產自湘西鳳凰的野生獼猴桃根和人工種植的“米良一號”獼猴桃根為原料,對其中多糖和熊果酸的提取、分離純化工藝進行研究,并且對兩種提取物

2、進行保肝功能的比較研究,主要研究結果如下:
　　 1.采用三元二次通用旋轉法,確定野生獼猴桃根中多糖微波水提工藝最優(yōu)條件為固液比(g:mL)1.8:30,萃取溫度61.5℃,萃取時間33.5 min,在此條件下,多糖的理論得率為12.34％,實際得率為12.34±0.01％,RSD=1.28％(n=5)。
　　 2.對野生獼猴桃根粗提物進行初步純化后,二乙基氨基(DEAE)纖維素柱層析純化的結果表明以0.1～1.0 mo

3、l/L的NaCl溶液為洗脫劑的多糖洗脫效果最佳。在此條件下,控制流速1.2 mL/min將獼猴桃根粗多糖進一步純化得到三個組分PK1、PK2和PK3,多糖得率分別為62.87％、8.24％、15.39％。通過理化性質鑒定反應以及紫外光譜分析的結果表明經DEAE-纖維素柱層析的獼猴桃根多糖PK1、PK2和PK3組分中含量均達到90％以上,其中PK1組成均一,符合國家中藥新藥的要求。
　　 3.采用四元二次回歸通用旋轉法,確定野生獼

4、猴桃根中熊果酸的微波提取工藝最優(yōu)條件為:乙醇濃度72.8％,固液比(g:mL)為4.2:25,萃取時間18.9 min,萃取溫度90.0℃,熊果酸微波萃取的理論得率為5.68％,驗證實驗值為5.66±0.01％,RSD=1.43％(n=5)。
　　 4.通過薄層層析(TLC)實驗研究發(fā)現(xiàn),熊果酸經過乙酸乙酯萃取后可以達到初步純化的目的,然后經真空濃縮可以得到熊果酸粗粉。通過對硅膠柱層析的洗脫溶劑的配比、硅膠粒徑大小的研究發(fā)現(xiàn),在

5、氯仿與甲醇的配比為18:1,粒徑為100～200目時,熊果酸的純度最高,達到85％以上,而且提取率也在65％以上。
　　 5.以小白鼠為實驗對象,以小鼠肝勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)的含量、血清中丙氨酸氨基轉移酶(AST)以及天門冬氨酸氨基轉移酶(ATL)的活性為測定指標,探討野生和“米良一號”獼猴桃根的不同提取物對CCl4致小鼠肝損傷的保護作用。實驗結果表明:與模型組比較,野生和“米良一號”獼猴桃根提