獼猴桃根活性成分的提取、分離純化及其保肝功能評(píng)價(jià)的研究.pdf

1、獼猴桃(Kiwifruit)屬獼猴桃科,落葉木質(zhì)藤本,在我國分布廣泛。獼猴桃的根或根皮含有多糖及苷類,萜類成分,鞣質(zhì),甾體、黃酮類等化學(xué)成分,具有健胃、清熱、解毒、利濕、祛風(fēng)的作用。因此,對(duì)獼猴桃根重要活性成分進(jìn)行提取分離純化工藝的研究以及對(duì)各提取物進(jìn)行保肝功能的評(píng)價(jià)具有十分重要的意義。
　　 本文以產(chǎn)自湘西鳳凰的野生獼猴桃根和人工種植的“米良一號(hào)”獼猴桃根為原料,對(duì)其中多糖和熊果酸的提取、分離純化工藝進(jìn)行研究,并且對(duì)兩種提取物

2、進(jìn)行保肝功能的比較研究,主要研究結(jié)果如下:
　　 1.采用三元二次通用旋轉(zhuǎn)法,確定野生獼猴桃根中多糖微波水提工藝最優(yōu)條件為固液比(g:mL)1.8:30,萃取溫度61.5℃,萃取時(shí)間33.5 min,在此條件下,多糖的理論得率為12.34％,實(shí)際得率為12.34±0.01％,RSD=1.28％(n=5)。
　　 2.對(duì)野生獼猴桃根粗提物進(jìn)行初步純化后,二乙基氨基(DEAE)纖維素柱層析純化的結(jié)果表明以0.1～1.0 mo

3、l/L的NaCl溶液為洗脫劑的多糖洗脫效果最佳。在此條件下,控制流速1.2 mL/min將獼猴桃根粗多糖進(jìn)一步純化得到三個(gè)組分PK1、PK2和PK3,多糖得率分別為62.87％、8.24％、15.39％。通過理化性質(zhì)鑒定反應(yīng)以及紫外光譜分析的結(jié)果表明經(jīng)DEAE-纖維素柱層析的獼猴桃根多糖PK1、PK2和PK3組分中含量均達(dá)到90％以上,其中PK1組成均一,符合國家中藥新藥的要求。
　　 3.采用四元二次回歸通用旋轉(zhuǎn)法,確定野生獼

4、猴桃根中熊果酸的微波提取工藝最優(yōu)條件為:乙醇濃度72.8％,固液比(g:mL)為4.2:25,萃取時(shí)間18.9 min,萃取溫度90.0℃,熊果酸微波萃取的理論得率為5.68％,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)值為5.66±0.01％,RSD=1.43％(n=5)。
　　 4.通過薄層層析(TLC)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),熊果酸經(jīng)過乙酸乙酯萃取后可以達(dá)到初步純化的目的,然后經(jīng)真空濃縮可以得到熊果酸粗粉。通過對(duì)硅膠柱層析的洗脫溶劑的配比、硅膠粒徑大小的研究發(fā)現(xiàn),在

5、氯仿與甲醇的配比為18:1,粒徑為100～200目時(shí),熊果酸的純度最高,達(dá)到85％以上,而且提取率也在65％以上。
　　 5.以小白鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以小鼠肝勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)的含量、血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)以及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ATL)的活性為測(cè)定指標(biāo),探討野生和“米良一號(hào)”獼猴桃根的不同提取物對(duì)CCl4致小鼠肝損傷的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與模型組比較,野生和“米良一號(hào)”獼猴桃根提