東亞三角渦蟲DjSLK基因的表達及功能分析.pdf

1、根據(jù)激酶結(jié)構(gòu)域的相對位置,Ste20相似激酶(SLK)可分為P21激活激酶(PAK)和生發(fā)中心激酶(GCK),P21激活激酶和生發(fā)中心激酶又可分為P21激活激酶Ⅰ–Ⅱ和生發(fā)中心激酶Ⅰ–Ⅷ。作為重要的多功能蛋白,Ste20相似激酶在增殖,分化,凋亡,細胞生長,細胞周期調(diào)控,細胞遷移等過程中發(fā)揮重要作用。渦蟲具有匪夷所思的形態(tài)可塑性和再生能力,且隨著原位雜交,基因沉默,表達序列標簽的收集,基因芯片等分子技術(shù)在渦蟲上的實現(xiàn),渦蟲已成為在穩(wěn)態(tài)和

2、再生過程中研究細胞功能的重要模式生物。
　　我們在東亞三角渦蟲中發(fā)現(xiàn)了一個Ste20相似激酶類似基因,并將其命名為DjSLK。DjSLK基因全長為1066 bp,含有879 bp的最大開放閱讀框,編碼292個氨基酸組成的蛋白質(zhì),相對分子量約為32.4 kDa。在NCBI上進行BLASTP發(fā)現(xiàn),該基因含有Pkinasec_like結(jié)構(gòu)域,深入的氨基酸序列比對表明,DjSLK與其它動物Ste20相似激酶的相似性為61.1％~72.2%

3、。進化分析顯示,DjSLK與C.sinensis及S.japonicum SLK聚群,并處于進化樹的底部,表明DjSLK為Ste20相似酶的原始類型。整體原位雜交結(jié)果表明,DjSLK表達于渦蟲包括腦和腹神經(jīng)索的中樞神經(jīng)系統(tǒng)。再生過程中,DjSLK的表達水平與再生時間呈正相關,并于再生的第七天達到最大值,第九天時回復到原初的表達水平。干擾DjSLK后,東亞三角渦蟲靜止不動,身體褶皺,膨脹,最終裂解死亡。熒光免疫組化的結(jié)果證明DjSLK與東