共振瑞利散射技術(shù)測(cè)定某些止吐劑、抗生素和酶的新方法研究.pdf

1、本文主要應(yīng)用共振瑞利散射技術(shù)對(duì)一些止吐劑（鹽酸格拉司瓊和鹽酸托烷司瓊）、喹諾酮類(lèi)抗生素（吡哌酸、鹽酸環(huán)丙沙星、鹽酸洛美沙星、鹽酸諾氟沙星和沙拉沙星）以及蛋白酶（溶菌酶和木瓜蛋白酶）進(jìn)行測(cè)定。研究了這些藥物分子與[PW12O40]3-、Pd(Ⅱ)、MoO42-等無(wú)機(jī)離子以及有機(jī)染料分子之間的相互作用。結(jié)合IR光譜、吸收光譜、熒光光譜和量化計(jì)算討論了它們相互作用的機(jī)理、結(jié)合模式、結(jié)合位點(diǎn)以及結(jié)合作用力等，以此建立起測(cè)定鹽酸格拉司瓊、鹽酸環(huán)丙

2、沙星、溶菌酶等的新方法，并將此法用于實(shí)際樣品的測(cè)定。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　 1.H3PW12O40和某些止吐劑相互作用的吸收和共振瑞利散射光譜研究及其分析應(yīng)用
　　 在0.1mol·L-1的HCl介質(zhì)中，一些止吐劑(ATM)如鹽酸格拉司瓊和鹽酸托烷司瓊可以和十二鎢磷酸(H3PW12O40)相互作用形成3∶1的二元配合物[(ATM)3PW12O40]。此配合物能夠自聚形成一種納米顆粒[(ATM)3PW12O40]n，其平

3、均粒徑為100nm。此時(shí)導(dǎo)致共振瑞利散射(RRS)和吸收光譜的顯著增強(qiáng)。在一定范圍內(nèi)，散射增強(qiáng)(△IRRS)和吸光度的增強(qiáng)（△A）均與止吐劑濃度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，據(jù)此建立了以H3PW12O40為光譜探針的簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確靈敏測(cè)定鹽酸格拉司瓊、鹽酸托烷司瓊的新方法。這兩種方法對(duì)鹽酸格拉司瓊和鹽酸托烷司瓊的檢出限分別為3.2ng·mL-1和4.0ng.mL-1(RRS法)，112.5ng·mL-1和100.0ng.mL-1(分光光度法)。將它

4、們用于格拉司瓊口腔崩解片含量檢測(cè)，平均回收率分別為103.9％和101.1％，此結(jié)果與藥典法一致。另外，本文用原子力顯微鏡對(duì)納米顆粒的形貌和粒徑進(jìn)行了表征，應(yīng)用密度泛函理論(DFT)B3LYP方法，對(duì)藥物分子進(jìn)行優(yōu)化，并借此對(duì)反應(yīng)機(jī)理和RRS光譜增強(qiáng)的原因進(jìn)行了討論。
　　 2.甲基橙-喹諾酮-鈀(Ⅱ)三元配合物的共振瑞利散射光譜研究及其分析應(yīng)用
　　 在pH3.3～4.4的BR緩沖溶液中，吡哌酸(PIP)、鹽酸環(huán)丙沙星

5、(CIP)、鹽酸洛美沙星(LOM)、鹽酸諾氟沙星(NOR)和沙拉沙星(SAR)等喹諾酮(QNS)類(lèi)抗生素能夠質(zhì)子化為正一價(jià)陽(yáng)離子(H·QNS+)，后通過(guò)靜電引力與甲基橙陰離子(MO-)形成電中性的離子對(duì)復(fù)合物，再進(jìn)一步與Pd(Ⅱ)形成六元環(huán)螯合物，從而引起溶液的共振瑞利散射(RRS)顯著增強(qiáng)，并出現(xiàn)新的散射峰。各個(gè)反應(yīng)體系的最大散射峰均位于360nm附近。在一定范圍內(nèi)，散射增強(qiáng)(△IRRS)與藥物的濃度成良好的線(xiàn)性關(guān)系，方法的檢出限介于

6、6.8～12.6ng.mL-1之間。據(jù)此建立了一種準(zhǔn)確靈敏、簡(jiǎn)便快速測(cè)定喹諾酮類(lèi)抗生素的新方法。方法具有良好的選擇性和重復(fù)性，適用于片劑、膠囊、滴眼液等藥物制劑的測(cè)定。還可用于服用環(huán)丙沙星后尿藥濃度的測(cè)定，為CIP藥代動(dòng)力學(xué)研究提供借鑒。文中通過(guò)二元體系和三元體系吸收光譜、熒光光譜和紅外光譜的比較，討論了反應(yīng)過(guò)程和反應(yīng)機(jī)理。從熒光-散射共振能量轉(zhuǎn)移、結(jié)合產(chǎn)物的疏水性和分子體積變化等方面對(duì)散射增強(qiáng)原因進(jìn)行了分析。
　　 3.MoO

7、42--酶-Pd(Ⅱ)三元混配物的共振瑞利散射、二級(jí)散射和倍頻散射光譜研究及其分析應(yīng)用
　　 在pH4.0的BR緩沖介質(zhì)中，溶茵酶和木瓜蛋白酶等酶以帶正電荷的陽(yáng)離子形式存在，它們不僅可以與PdC12結(jié)合形成配合物，而且可以借助靜電引力與MoO42-相互作用。這兩種力的協(xié)同作用，使三者形成了以L(fǎng)yso為主體的疏水性三元混配物。此混配物的形成引起了共振瑞利散射(RRS)、二級(jí)散射(SOS)和倍頻散射(FDS)的顯著增強(qiáng)并產(chǎn)生新的散射

8、光譜，其最大RRS、SOS和FDS波長(zhǎng)分別位于310、560和390nm附近。在一定范圍內(nèi)，三種散射增強(qiáng)(△IRRS、△ISOS和△IFDS)均與酶的濃度成正比，據(jù)此建立了以MoO42--pd(Ⅱ)為光譜探針的簡(jiǎn)便快速測(cè)定蛋白酶的新方法。方法的靈敏度很高，對(duì)溶菌酶的檢出限在4.3～9.6ng·mL-1之間，對(duì)木瓜蛋白酶的檢出限在14.8～106ng·mL-1之間，均可用于痕量蛋白酶的測(cè)定。以靈敏度較高的MoO42--Lyso-PdCl2