具有抗2型糖尿病活性的海洋藥物HS203的制備及其初步藥代動力學(xué)研究.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，糖尿病的發(fā)病率迅速上升。據(jù)世界衛(wèi)生組織公布，全世界已有3.47億糖尿病患者。中國已成為世界糖尿病發(fā)病人數(shù)最多的國家，發(fā)病率達9.7％。2型糖尿病患者占糖尿病總患病人數(shù)的90%以上，以胰島素分泌不足和胰島素抵抗為主要特征。2型糖尿病的治療不依賴胰島素，主要通過口服降糖藥治療，現(xiàn)有的口服降糖藥多存在著繼發(fā)性失效，誘發(fā)低血糖及價格昂貴等缺點。因此，有必要開發(fā)新型口服降糖藥。大量研究表明，糖尿病的發(fā)生和體內(nèi)糖胺聚糖的改變

2、有密切關(guān)系，補充鉻可以顯著改善糖尿病人的糖代謝和血脂代謝。海洋寡糖具有資源豐富，低毒和生物活性好等優(yōu)點，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。基于以上幾點，本文選擇與糖胺聚糖結(jié)構(gòu)類似的海洋酸性寡糖與鉻離子進行配合，以期發(fā)揮兩者的協(xié)同抗糖尿病作用，開發(fā)新型口服降糖藥。
　　本論文在前期研究的基礎(chǔ)上，優(yōu)化了抗2型糖尿病海洋藥物HS203的制備條件。通過核磁共振碳譜，紫外-可見全波長光譜，紅外光譜等分析手段對制得的HS203進行了結(jié)構(gòu)表征。然后對HS

3、203膠囊劑的制備和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了研究，確定了HS203膠囊制劑配方，并對藥物在加速條件下6個月和室溫條件下24個月的穩(wěn)定性進行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HS203質(zhì)量穩(wěn)定，選用的包裝材料也符合要求，對存儲條件無苛刻要求。
　　采用Wistar大鼠2型糖尿病模型和KM小鼠2型糖尿病模型對HS203的降血糖活性及其機制進行了研究，結(jié)果表明HS203在糖尿病模型動物上表現(xiàn)出較好的降血糖活性，且沒有急性降血糖作用，不存在一過性血糖降低的危險，其

4、通過提高胰島素敏感指數(shù)降低血糖，且具有一定的腎臟保護和減輕胰腺損傷作用，有較好的抗糖尿病應(yīng)用前景。
　　對 HS203藥物在小鼠及 beagle犬內(nèi)的急性毒性試驗進行了研究，結(jié)果表明HS203藥物在動物體內(nèi)毒性很小，在可給藥的最大劑量下，動物仍無死亡情況發(fā)生，因此HS203安全性高，毒副作用小。采用柱后衍生-高效液相色譜法對HS203初步的藥代動力學(xué)進行了研究，結(jié)果表明HS203藥物注射給藥后在大鼠體內(nèi)代謝較快，t1/2α為3.3

5、5±0.78 min?？诜o藥后，藥物在大鼠體內(nèi)代謝較慢，t1/2α為143.2±9.8 min，在beagle犬內(nèi)吸收較快。在beagle犬內(nèi)的毒代動力學(xué)表明，藥物連續(xù)給藥后，在第8天和第30天血藥濃度明顯升高，且在雄犬內(nèi)血藥濃度較雌犬內(nèi)高。說明藥物經(jīng)口服給藥后，在大鼠和 beagle犬內(nèi)的代謝存在種屬差異，且代謝過程可能與性別有關(guān)。
　　由于HS203屬于口服用藥，它屬于非淀粉類糖類物質(zhì)，該類物質(zhì)對腸道微生物的影響，以及它是否

6、被降解以及降解產(chǎn)物情況需要研究。本文采用厭氧發(fā)酵系統(tǒng)對HS203在不同人腸道微生物中的利用情況進行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：HS203可被微生物降解為更低聚合度寡糖。采用PCR-DGGE的方法對HS203為底物發(fā)酵的樣品菌群結(jié)構(gòu)進行了研究，結(jié)果表明HS203可以明顯影響腸道微生物的菌群結(jié)構(gòu)。此外，對厭氧培養(yǎng)過程中微生物發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸進行了測定，結(jié)果表明HS203能促進短鏈脂肪酸的產(chǎn)生。采用稀釋涂板法進一步對細(xì)菌進行篩選分離，從腸道微生物中

7、分離得到了兩株可以利用HS203的細(xì)菌，分別為解木聚糖擬桿菌（Bacteroides xylanisolvens）和卵形擬桿菌(Bacteroides ovatus)，說明擬桿菌在利用HS203和褐藻膠及其寡糖寡糖過程中具有重要的作用。
　　綜上所述，本論文對海洋寡糖藥物HS203及其制劑的制備工藝，理化性質(zhì)及穩(wěn)定性進行了研究。對其在糖尿病動物模型上的降血糖活性進行了研究，然后對其急性毒性試驗進行了考察，還對HS203在不同動物體