內(nèi)源性DNA加合物方法建立及人群生物監(jiān)測(cè).pdf

1、DNA加合物是一類極其重要的生物標(biāo)志物，既可以作為接觸（暴露）生物標(biāo)志物，準(zhǔn)確反映化學(xué)毒物接觸的內(nèi)劑量來(lái)評(píng)價(jià)化學(xué)毒物的毒性，為人群生物監(jiān)測(cè)及分析致癌性化學(xué)污染物的暴露提供有效的手段，又可以作為效應(yīng)標(biāo)志物，篩檢高危人群，為生物體的癌癥風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供重要信息，同時(shí)，可發(fā)展合理的癌癥預(yù)防和治療策略。在人類組織中絕大多數(shù)的突變，可以確定是內(nèi)源性的。內(nèi)源性DNA損傷比起外源性發(fā)生的頻率更高。因此，內(nèi)源性DNA加合物的檢測(cè)是毒理學(xué)研究的重點(diǎn)，具有重要

2、的應(yīng)用價(jià)值。但內(nèi)源性DNA加合物在人體中含量很低，這就要求檢測(cè)方法靈敏度要高、檢測(cè)限低、特異性要好。
　　長(zhǎng)期接觸苯誘發(fā)再生障礙性貧血和白血病的因果關(guān)系已經(jīng)流行病學(xué)的研究證實(shí)。本研究以基于隊(duì)列的橫斷面研究為基礎(chǔ)，通過(guò)建立高特異性、高靈敏度和高通量的UPLC-MS-MS檢測(cè)方法，檢測(cè)接苯作業(yè)工人和非接苯作業(yè)工人生物樣本（尿、血）中內(nèi)源性etheno-DNA加合物作為生物標(biāo)志物，研究苯誘發(fā)氧化應(yīng)急和脂質(zhì)過(guò)氧化“二次打擊”導(dǎo)致的DNA氧

3、化損傷與機(jī)體抗氧化防御機(jī)制之間的關(guān)聯(lián)，揭示苯中毒和致癌新的分子機(jī)制，為苯中毒和致癌早期臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。本文的主要研究?jī)?nèi)容包括以下兩個(gè)方面:
　　1、在本實(shí)驗(yàn)室研究基礎(chǔ)上，建立和優(yōu)化了UPLC-ESI-MS/MS檢測(cè)血中etheno-DNA(εdA，εdC)加合物的方法。本方法靈敏度高，檢測(cè)限低，回收率好，樣品需求量小(20μg)，最低可以檢測(cè)5μgDNA。該方法能夠用于大樣本血中εdA，εdC的定量分析。εdA，εdC