熱帶假絲酵母發(fā)酵生產(chǎn)十三碳二元酸的強化研究.pdf

1、本文以熱帶假絲酵母為生產(chǎn)菌種，就菌種的改造、小分子效應物對DCA13產(chǎn)量影響和發(fā)酵過程的優(yōu)化等進行了研究。工作包括菌株的馴化、紫外線照射誘變、亞硝酸鈉誘變、搖瓶發(fā)酵工藝條件優(yōu)化、小分子效應物對DCA13產(chǎn)量的影響，以及DCA13的提取精制等。 以熱帶假絲酵母為初發(fā)菌株，對其進行了循減遞進的馴化，采用紫外線照射和亞硝酸鈉誘變結合的方法對生產(chǎn)菌株進行了改造，通過對照平板和指示劑平板篩選α、ω-氧化能力增強，β-氧化能力減弱的突變菌株

2、，得到一株在搖瓶條件下能夠通過發(fā)酵過程使DCA13的產(chǎn)量達34g/L的生產(chǎn)菌株0.1-2，比初發(fā)菌株發(fā)酵生產(chǎn)DCA13的產(chǎn)量提高了54％。 發(fā)酵過程中在培養(yǎng)基中加入小分子效應物(吐溫80、乙酸鈉和丙烯酸)，研究了它們對DCA13產(chǎn)量的影響。試驗結果表明，小分子效應物對DCA13產(chǎn)量具有明顯影響。乙酸鈉、丙烯酸均能抑制菌體的β-氧化，添加吐溫80有利于菌體吸收和轉(zhuǎn)化烷烴。添加小分子效應物后，發(fā)酵過程的DCA13產(chǎn)量達45g/L。

3、 發(fā)酵過程結束后，發(fā)酵液中殘留的烷烴可以回收利用，而且用來替代部分新烷烴進行發(fā)酵產(chǎn)酸時，可以在一定程度上提高DCA13的產(chǎn)量。 在DCA13搖瓶發(fā)酵工藝條件優(yōu)化的試驗中，對新舊發(fā)酵工藝進行了比較，最終選擇了在發(fā)酵初期不加入或者少加入烷烴，在發(fā)酵后期加入總量為10％(V/V)烷烴的新工藝，此時DCA13產(chǎn)量達43g/L，較優(yōu)化前提高了26％。 通過對酸堿沉淀法制取純凈DCA13工藝路線的研究，得出提取精制DCA13的