酵母菌株在黃酒發(fā)酵中的代謝特性及單倍體制備的研究.pdf

1、本文選擇并建立了黃酒中高級醇的測定方法,研究了四種酵母菌株的代謝特性,結(jié)果表明各菌株之間發(fā)酵性能存在明顯差異,并篩選出一種性能優(yōu)良的酵母菌株進(jìn)行單倍體制備,將獲得到的單倍體和親本進(jìn)行發(fā)酵性能的比較,保藏單倍體供本實(shí)驗室對該菌株深層次的研究。
　　 氣相色譜法中,用HP-INNOWAX(30m*0.32mm*0.5μm)色譜柱,在載氣流速2.0 mL/min;進(jìn)樣量為1μL;分流比為1:10;程序升溫為:45℃保持1min,以15

2、℃/min的速度升溫至120℃,保持5 min,再以15℃/min的速度升溫至220℃,保持5min的條件下,以峰面積外標(biāo)法定量測定黃酒中的高級醇,方法的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.496％-3.331％,加標(biāo)回收率為72.20％-115.02％。
　　 對四種酵母菌在液化法發(fā)酵和傳統(tǒng)法發(fā)酵中的發(fā)酵性能分析得到:在液化法發(fā)酵和傳統(tǒng)法發(fā)酵中,酵母b的pH在3.8到4.1中穩(wěn)定變化,其總糖含量低于20g/L,總酸低于6 g/L,氨基酸態(tài)氮在液

3、化法發(fā)酵中含量高,為0.24g/L,酒精度含量均在12％vol以上,且高級醇含量較低。故選擇酵母b進(jìn)行單倍體分離。
　　 對釀酒酵母產(chǎn)孢條件優(yōu)化得到:酵母b的產(chǎn)孢溫度控制在28℃,在產(chǎn)孢培養(yǎng)基McClary培養(yǎng)基上培養(yǎng)7 d,產(chǎn)孢率可達(dá)68.90％,蝸牛酶濃度及酶解時間是影響孢子釋放的關(guān)鍵因素,最適酶濃度為3％,酶解時間為40 min。
　　 對親本酵母b與單倍體bb1和單倍體bb2的發(fā)酵性能比較得到:分離出來的單倍體b