新型自由基捕獲探針和納米抗氧化劑的制備及性能研究.pdf

1、自由基(尤其是活性氧(ROS)自由基)在生物體系中具有不容忽視的生理學(xué)和病理學(xué)作用,因此對(duì)有關(guān)自由基的檢測(cè)及過量自由基的清除兩方面的研究對(duì)于了解自由基在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的作用具有至關(guān)重要的意義。然而,現(xiàn)有的自由基捕獲探針卻難以實(shí)現(xiàn)生物活體內(nèi)自由基的檢測(cè),其中的一個(gè)主要原因是由于捕獲探針在自由基產(chǎn)生區(qū)域的局部濃度較低造成的;另外,盡管抗氧化劑能夠有效地清除體內(nèi)多余的自由基,達(dá)到維系生物體內(nèi)的化學(xué)還原平衡的作用,但由于消化道系統(tǒng)外排機(jī)制占主要

2、地位,使得抗氧化劑的口服生物利用度很低。針對(duì)以上問題我們?cè)O(shè)計(jì)合成了兩種高效的自由基捕獲探針和兩種金納米抗氧化劑:
　　(1)合成了線性硝酮捕捉探針PBN的衍生物DSC-PBN(N-(4-(((2,5-dioxopyrrolidin-1-yloxy)-carbonyloxy)methyl)benzylidene)-2-methylpropan-2-N-oxide)和環(huán)狀硝酮捕獲探針的衍生物L(fēng)-tyr-EMPO(L-tyrosine

3、methyl-pyrroline-N-oxide)。用UV、MS、1HNMR等一系列手段對(duì)其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。ESR研究表明,DSC-PBN對(duì)碳中心自由基具有較好的捕捉效果,但卻難以實(shí)現(xiàn)對(duì)超氧陰離子自由基的捕獲,從而限制了其應(yīng)用范圍。L-tyr-EMPO捕獲探針不僅能實(shí)現(xiàn)對(duì)O2-.,.OH,.OR,和.R等多種自由基的捕捉,而且其超氧陰離子加合物的半衰期達(dá)6.5min。此外,這種共價(jià)結(jié)合的新方式幾乎可以應(yīng)用到所有的蛋白質(zhì)或多肽的N端修

4、飾,而且條件較為溫和,不易導(dǎo)致蛋白質(zhì)(或抗體)發(fā)生變性。
　　(2)利用共價(jià)鍵作用和非共價(jià)吸附作用合成了兩種金納米抗氧化劑Au@PEG3danshensu和Au-danshensu-GA,其粒徑大小分別為4.5nm和110nm,并通過IR、UV、TEM(電鏡)、XPS等進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。自由基清除實(shí)驗(yàn)表明這兩種金納米抗氧化劑均具有高效的自由基清除活性。DPPH.自由基清除實(shí)驗(yàn)表明Au@PEG3danshensu具有8.93倍于丹參素