大腸桿菌中提高番茄紅素產(chǎn)量的代謝途徑修飾.pdf

1、番茄紅素是類胡蘿卜素的一種，具有極強的抗氧化能力和消除自由基的能力，其在抗衰老和防癌方面的功能受到人們越來越多的關注。使用番茄為原料制備番茄紅素的方法成本較高且提取率不高，不適用于工業(yè)生產(chǎn)，因而人們主要應用微生物發(fā)酵的方法制備番茄紅素。與天然產(chǎn)番茄紅素的微生物相比，應用基因工程構建的產(chǎn)番茄紅素大腸桿菌具有發(fā)酵時間短、安全、經(jīng)濟等優(yōu)點，是工業(yè)化生產(chǎn)的主要備選菌種。
　　 在本研究中，主要應用代謝工程和定向進化的技術方法對產(chǎn)番茄紅素

2、大腸桿菌的代謝途徑進行了修飾，目的是獲得提高番茄紅素產(chǎn)量的大腸桿菌工程菌。以代謝途徑關鍵酶基因dxs和細胞中的轉錄調控因子rpoS為對象，進行了基因組合表達、啟動子替換與定向突變，均提高了番茄紅素的產(chǎn)量。然而對結果進行整合與篩選后，番茄紅素產(chǎn)量并未繼續(xù)提高。得出以下結論:
　　 首先，關鍵酶基因dxs和轉錄調控因子rpoS的過量表達能夠定向提高代謝流，從而提高番茄紅素產(chǎn)量73.6％和133.6％。
　　 第二，基因組的基