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1、利用平皿生化反應(yīng)方法選育亞硝酸鹽高效降解菌株,依據(jù)細(xì)菌鑒定手冊(cè)進(jìn)行判定,對(duì)其降解亞硝酸鹽的條件進(jìn)行優(yōu)化,并研究了它在泡菜中降解亞硝酸鹽的情況,得到結(jié)果如下:
(1)從土壤中篩選出的實(shí)驗(yàn)菌株,根據(jù)《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(第8版)結(jié)合生理生化反應(yīng)特點(diǎn)判定,2號(hào)菌株、11號(hào)菌株均為地衣芽孢桿菌(BacillusLicheniformis),分別命名為地衣芽孢桿菌FS-2、FS-3。依據(jù)BDBBL鑒定系統(tǒng),將獲得的菌株與從整腸生中篩
2、選的菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行比對(duì),確定FS-2、FS-3菌株為地衣芽孢桿菌,將其作為實(shí)驗(yàn)菌株,進(jìn)行亞硝酸鹽降解研究。
(2)實(shí)驗(yàn)菌株FS-2菌株和FS-3菌株的最佳種齡時(shí)間為10h和8h.通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)可得,地衣芽孢桿菌降解亞硝酸鹽的最優(yōu)發(fā)酵條件:FS-2號(hào)菌碳源(可溶性淀粉)1.2%、混合氮源(蛋白胨∶牛內(nèi)膏)1∶1、碳氮比4∶1、pH6.0、接種量10%、裝液量25mL降解率25.63%;FS-3號(hào)菌碳源(蔗糖
3、)0.6%、混合氮源(蛋白胨∶牛肉膏)1∶1、碳氮比5∶1、pH5.0、接種量14%、裝液量40mL,降解率23.86%.
(3)采用60Co輻照得誘變菌株,與未誘變的原始菌進(jìn)行比較,篩選出三株降解能力強(qiáng)的菌株,命名為:地衣芽孢桿菌FSC-1、FSC-2和FSC-3。采用Box-behnken設(shè)計(jì)優(yōu)化誘變后菌株的發(fā)酵條件,得出地衣芽孢桿菌FSC-1、FSC-2和FSC-3三株誘變菌降解亞硝酸鹽的最適培養(yǎng)基:FSC-1號(hào)菌碳
4、源0.9327g/L,降解率24.17%;FSC-2號(hào)菌碳源0.7696g/L、碳氮比4.873、混合氮源(蛋白胨∶牛肉膏)3.530,降解率25.43%;FSC-3號(hào)菌碳源為1.447g/L、碳氮比3.048、混合氮源(蛋白胨∶牛肉膏)2.058,降解率19.61%。
(4)地衣芽孢桿菌FSC-1、FSC-2和FSC-3作為泡菜中的添加菌株進(jìn)行亞硝酸鹽降解試驗(yàn),泡菜中亞硝酸鹽含量有明顯降低,且菌株FSC-3的降解效果高于
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