脫脂米糠聯(lián)產(chǎn)植酸和蛋白酶解物研究.pdf

1、本論文研究了脫脂米糠的綜合利用。脫脂米糠提取植酸后利用蛋白酶酶解米糠中的蛋白質(zhì)獲得米糠蛋白酶解物(RBPH),同時(shí)研究了植酸的純化、RBPH的精制和功能性質(zhì)。
　　 首先采用酸浸法得到植酸提取液,綜合考慮植酸提取率和蛋白損失率,利用Box-Benhnken中心組合試驗(yàn)和響應(yīng)面分析,確定了植酸的最佳提取條件:pH3.9,液料比9:1,提取時(shí)間4.4h,提取溫度50℃。在該工藝條件下植酸提取率達(dá)85.83％,蛋白質(zhì)損失率為10.67

2、％。
　　 利用堿沉淀法和D318型弱堿性陰離子交換樹(shù)脂吸附洗脫分離純化植酸。首先選擇ca(OH)2-氨水兩步沉淀法沉淀植酸,沉淀pH9.0。其次,使用D318型弱堿性陰離子交換樹(shù)脂對(duì)植酸分離純化,吸附洗脫條件分別為:吸附液pH2.5,流速1.0mL／min、濃度10mg／mL,NaOH洗脫液流速1.0mL／min、濃度1.5 mol／L。在此條件下,植酸回收率達(dá)96％。最終植酸提取率為79.20％,純度為94.72％。

3、　　 利用堿性蛋白酶和復(fù)合蛋白酶雙酶分步酶解制備RBPH。利用Box-Benhnken中心組合試驗(yàn)和響應(yīng)面分析,得出了制備RBPH的最佳工藝條件:堿性蛋白酶酶解條件pH9.0,溫度60℃,酶添加量4000 NPU／g,時(shí)間1.8 h;復(fù)合蛋白酶酶解條件pH7.5,溫度45℃,酶添加量3200 NPU／g,時(shí)間2 h。經(jīng)雙酶分步酶解提取,米糠中蛋白質(zhì)提取率為79.12％,RBPH純度為34.51％,水解度為23.34％。
　　

4、采用50 KDa超濾膜除去RBPH中的大分子雜質(zhì),并利用DA201-C大孔吸附樹(shù)脂對(duì)RBPH進(jìn)行分離純化。確定了RBPH吸附洗脫的工藝條件:吸附液pH4.5,吸附流速0.5 mL／min,解吸流速1.0mL／min。以不同濃度乙醇進(jìn)行分級(jí)洗脫,得到了具有不同氨基酸組成和疏水值的RBPH(RBPH-25,RBPH-50,RBPH-75,RBPH-100),RBPH回收率為96.43％。RBPH的純度從粗提物的34.51％升至60％、～78

5、％,RBPH得到了富集。同時(shí),經(jīng)精制后米糠中蛋白質(zhì)最終提取率為66.42％。
　　 實(shí)驗(yàn)表明,RBPH各組分具有良好的乳化活性,并具有很強(qiáng)的抗氧化性和較好的降膽固醇活性。與大豆分離蛋白(SPI)相比,RBPH具有較好的乳化性,而且乳化穩(wěn)定性較強(qiáng),且25％組分在弱酸性和中性條件下具有最好的乳化性。而75％乙醇洗脫組分(RBPH-75)具有最高的抗氧化活性；RBPH各組分具有很強(qiáng)的DPPH自由基清除能力、抑制亞油酸自動(dòng)氧化能力和還原