鳶烏賊蛋白酶解物抗氧化特性的研究.pdf

1、上海海洋大學碩士學位論文鳶烏賊蛋白酶解物抗氧化特性的研究摘要鳶烏賊（sthenoeuthisoualaniensis）隸屬鞘亞綱，柔魚科，鶯烏賊屬，其廣泛分布于印度洋、太平洋的赤道和亞熱帶海域中，在中國南海中南部蘊藏著大量的鳶烏賊資源。鳶烏賊蛋白質(zhì)含量豐富，但由于肉質(zhì)較硬而不受大眾喜歡。近年來，捕獲的鳶烏賊主要被用來制作成魷魚絲外銷。本文以鳶烏賊為原料，采用酶解法獲得其蛋白酶解物，利用響應(yīng)面試驗優(yōu)化酶解鳶烏賊蛋白制備抗氧化肽的最佳工藝，

2、并采用超濾法、凝膠色譜法、反向高效液相色譜法（RPHPLC）和電噴霧電離質(zhì)譜法等手段對酶解產(chǎn)物進行分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定。同時探討了溫度、光照、pH、食品輔料（蔗糖、海藻糖、NaCl、檸檬酸）、防腐劑（山梨酸鉀和苯甲酸鈉）、金屬離子（Cu2、Zn2、Mg2、Ca2和K）、人工模擬胃腸道消化等對鳶烏賊酶解產(chǎn)物的抗氧化穩(wěn)定性以及其功能特性包括乳化性和乳化穩(wěn)定性、起泡性和泡沫穩(wěn)定性、吸水性、持水性和吸油性等，為鳶烏賊蛋白的高值利用和開發(fā)鳶烏賊抗氧

3、化肽功能型產(chǎn)品提供一些理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：1.利用響應(yīng)面分析法對酶法水解鳶烏賊蛋白制備抗氧化肽的工藝條件進行優(yōu)化。首先通過單因素實驗最終確定木瓜蛋白酶為水解鳶烏賊蛋白制備抗氧化肽的最佳用酶，然后在單因素的基礎(chǔ)上以加酶量、液料比、酶解時間為自變量，DPPH自由基清除率為響應(yīng)值，建立二次回歸設(shè)計模型，經(jīng)修正后得到最佳酶解條件為：加酶量為0.66%（WW），液料比為10.2（VW)，酶解時間為380min，在此條件下DPPH自由基清除率為

4、89.80%，與模型預測值相吻合。另外，氨基酸分析表明與鳶烏賊蛋白相比，優(yōu)化后的酶解產(chǎn)物中必需氨基酸含量提高了2.2倍，抗氧化性氨基酸蛋氨酸、色氨酸等分別提高了7.2、25.6倍。2.采用分子量為5kDa的超濾膜進行超濾，比較了酶解液（PFSPH）、分子量大于5kDa（PFSPHI）和分子量小于5kDa（PFSPHII）的組分的抗氧化活性，結(jié)果表明：分子量小于5kDa（PFSPHII）的組分抗氧化活性最強。采用凝膠色譜SephadexG

5、25對組分PFSPHII進行分離，得到四個不同的組分（A、B、C、D），分別測定四個組分的DPPH自由基清除能力的半抑制濃度和還原力大小，結(jié)果表明：組分C的上海海洋大學碩士學位論文StudyonAntioxidantPropertyofEnzymaticHydrolysatesfromPurplebackFlyingSquidABSTRACTPurplebackflyingsquidbelongtocoleoideaommastreph

6、idaesymtectoteuthiswidelydistributedintheequatofIndianOceanPacificsubtropicalwaters.SouthcentralofsouthChinaseacontainsalargenumberofPurplebackflyingsquid.Purplebackflyingsquidisakindoffoodmaterialwhoseproteincontentishi

7、gh.Butpubliccannotacceptitbecauseofthehardmeat.Inrecentyearsthecapturedpurplebackflyingsquidwasmainlymadeintoshreddedsquidfexpt.Inthestudyantioxidantpeptideswerepreparedfrompurplebackflyingsquidproteinthroughcontrolleden

8、zymatictechnology.Responsesurfacemethodswereusedtooptimizethehydrolysisconditionsofpurplebackflyingsquidfproductionofantioxidantpeptides.PurplebackflyingsquidwasisolatedpurifiedIdentifiedbyultrafiltrationgelfiltrationchr

9、omatographyreversehighperfmanceliquidchromatography(RPHPLC)electrosprayionization(ESI)massspectrometer.ThestudyinvestigatedtheeffectsoftemperaturepHlightfoodmaterials（sucrosetrehalosecitricacidNaCl）preservatives(potassiu

10、msbatesodiumbenzoate)metalions（Cu2、Zn2Mg2、Ca2、K）gastrointestinaldigestioninvitroontheantioxidantstabilityofthepeptidesfrompurplebackflyingsquidfunctionalproperties(emulsifyingpropertiesemulsionstabilityfoamingpropertiesf

11、oamingstabilitythewaterabsptioncapacitywaterholdingcapacityoilabsptioncapacity)ofenzymatichydrolysates.Thatprovidesometheeticalbasisfthehighvalueofutilizationofpurplebackflyingsquidproteindevelopmentoffunctionalproductof

12、antioxidantpeptides.mainresultsareasfollows:1.Responsesurfacemethodswereusedtooptimizethehydrolysisconditionsofpurplebackflyingsquid(Sthenoeuthisoualaniensis)fproductionofantioxidantpeptides.Papainwasoptimumenzymeedbythe