發(fā)酵法生產(chǎn)1,3-丙二醇菌株的選育.pdf

1、1,3-丙二醇（1,3-propanediol，1,3-PD）是一種重要的化工原料，作為合成中間體被廣泛應用于化工、食品、化妝品和醫(yī)藥等行業(yè)。與傳統(tǒng)的化學合成法相比，微生物發(fā)酵法生產(chǎn)1,3-PD是一種綠色環(huán)保的方法，日益成為人們研究的熱點。本文從自然界取樣，經(jīng)初篩、復篩和誘變育種，篩選高產(chǎn)菌株。對篩選出的菌株進行了分類學地位鑒定，并對發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化，在5L發(fā)酵罐中研究了菌株2-1的發(fā)酵特性。
　　 （1）以甘油為

2、唯一碳源，從活性污泥等樣品中篩選能代謝甘油的菌株。采用不同的篩選策略及平板上菌落挑取策略，以達到快速、高效獲得高產(chǎn)菌株的目的。氣相色譜法檢測發(fā)酵液中1,3-PD含量。經(jīng)初篩、復篩獲得8株1,3-PD產(chǎn)量相對較高的菌株。并對菌株2-1進行了誘變育種。
　　 （2）對篩選的1-3、2-1等八株菌通過形態(tài)學鑒定、生理生化試驗、16S rDNA序列分析鑒定其分類學地位。結果顯示：1-3為弗氏檸檬菌（Citrobacter freundi

3、i）、1-13、2-1、2-16、4-15為肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）、1-14、1-15、1-16為銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。
　　 （3）以菌株2-1為研究對象，三角瓶液體培養(yǎng)優(yōu)化培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。經(jīng)單因素及正交試驗，最優(yōu)培養(yǎng)基配比及培養(yǎng)條件為：初始甘油濃度50g/L，(NH4)2SO4 0.05 mol/L,NaH2PO4 0.006 mol/L，酵母浸