茶籽餅中茶皂素的提取純化與茶籽多糖的提取.pdf

1、我國茶籽資源十分豐富,對茶籽餅粕進行綜合開發(fā)利用,應(yīng)用前景廣闊,經(jīng)濟效益明顯。本研究分別采用分光光度法和反相高效液相色譜法(HPLC)對茶籽餅中茶皂素進行檢測,比較了兩種定量分析方法,并確定了用反相高效液相色譜法檢測茶籽餅中茶皂素的含量,同時采用苯酚-硫酸法對茶籽餅中茶籽多糖進行檢測。優(yōu)化了茶油、茶皂素和茶籽多糖的提取工藝；采用了大孔樹脂對粗茶皂素進行純化,得到高純度茶皂素；提出了一整套工藝流程,有望實現(xiàn)從茶籽餅中得到茶油、茶皂素和茶籽

2、多糖等產(chǎn)品。主要研究內(nèi)容如下:
　　 (1)茶皂素的定量分析
　　 研究了反相高效液相色譜法(HPLC)測定茶皂素含量的方法:以VP-ODS(250mm×4.6 mm,C18,5μm)作分析柱,以甲醇.-(v/v=9/1)作流動相,流速控制在1.0mL/min,檢測波長280 nm,以質(zhì)量濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,得到工作曲線為 Y=3.02×106X-1.16×104,線性相關(guān)系數(shù)為0.9995。回收率為97.02

3、％～102.82％。通過反相高效液相色譜法測定茶籽餅中粗茶皂素的含量為11.89％。該法具有相對標準偏差較小,精密度和回收率高,操作簡便等優(yōu)點,是一種較好的分析方法。
　　 (2)茶籽多糖的分析方法
　　 采用苯酚-硫酸法測定茶籽多糖,于490 nm處測吸光度,得到葡萄糖標準曲線并線性回歸得到方程式:Y=173.48X-28.262(Y表示葡萄糖含量/μg,X表示吸光度),回歸系數(shù)r=0.9965。通過實驗可得茶籽多糖的

4、換算因子f=4.2783,根據(jù)公式:Y=mCf/M可計算茶籽多糖純度。
　　 (3)茶油和茶皂素的
　　 提取依據(jù)茶油和茶皂素不同的物理與化學性質(zhì),采用了不同的萃取劑并進行比較,確定采用石油醚(沸程60℃～90℃)和甲醇溶液先后分別提取茶油和茶皂素。采用索氏抽提的方法提取茶油,采用超聲波法提取粗茶皂素。
　　 石油醚提取茶油得率高、毒性低,且損耗少、回收率高。本實驗優(yōu)化條件提取茶油,在最佳工藝條件下進行實驗,即加

5、熱時間2 h、料液比7 mL/g、回流速度5 min/次,茶油的提取率為7.5％。
　　 以純甲醇為提取劑超聲波輔助提取茶皂素。實驗得出較佳提取工藝參數(shù)為:超聲頻率40kHz,提取溶液溫度40℃,超聲提取時間25 min,液固比為6 mL/g,超聲功率250W,在此條件下進行實驗,茶皂素得率為14.2％。
　　 (4)茶皂素的純化
　　 采用大孔吸附樹脂 AB-8對粗茶皂素進行吸附,調(diào)節(jié)茶皂素溶液pH=5進行上樣

6、,結(jié)果表明:吸附量32.1 mg/mL樹脂,吸附率88％。用1％的NaOH溶液進行洗脫,被吸附茶皂素中的雜質(zhì)和色素大部分被洗除,然后采用85％～95％甲醇進行解吸,結(jié)果表明:茶皂素上樣液pH=5、吸附時間2 h后,先用1％的NaOH溶液洗脫除雜質(zhì)和色素,再用95％甲醇洗脫(洗脫液與上樣液體積比5:1),在此條件下得到的洗脫液濃縮至一定體積,經(jīng)丙酮沉淀,甲醇結(jié)晶可得到高純度的茶皂素晶體,測得其純度為95.6％。
　　 (5)茶籽多