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1、在DNA傳感器的研究中,DNA的固定化是一個(gè)關(guān)鍵性問(wèn)題。通過(guò)改進(jìn)DNA的固定化工藝,可以減少DNA固定步驟及固定過(guò)程中化學(xué)試劑的使用,提高DNA傳感器的靈敏度。因此DNA的固定化對(duì)DNA傳感器的性能及應(yīng)用有著重大影響。 將鈷鋁水滑石納米片引入DNA傳感器中,作為固定DNA的載體修飾于電極表面,利用其高比表面積和良好的導(dǎo)電性能,能夠簡(jiǎn)化DN_A固定方法,增加DNA固定量,增大DNA電極電流響應(yīng),降低檢測(cè)限,提高檢測(cè)的靈敏度,有利于
2、將DNA電極發(fā)展成微量樣品檢測(cè)裝置。本論文采用水滑石納米片(LDHNS)作為固定DNA的載體,制備DNA/LDHNS修飾電極,構(gòu)建電化學(xué)DNA傳感器,并研究其檢測(cè)性能。論文包括以下內(nèi)容: 1、采用LDHNS作為固定DNA的載體,在玻碳電極(GCE)表面固定鯡魚精子DNA;制成的DNA/LDHNS/GCE在20 μmol·L<'-1>MB-50mmol·L<'-1> Tris-HCl緩沖溶液中進(jìn)行電化學(xué)行為的研究,該電極可以對(duì)緩沖
3、溶液中存在的一定量苯酚進(jìn)行檢測(cè),線性范圍為4-20μmol·L<'-1>,最低檢測(cè)限為5 nmol·L<'-1>;而DNA/LDHNS/GCE在緩沖溶液中有揮發(fā)酚類、胺類及無(wú)機(jī)鹽等干擾物存在的時(shí)候(干擾物與苯酚濃度相等),其苯酚的峰電流受影響程度均不超過(guò)5%; DNA/LDHNS/GCE的重復(fù)性和穩(wěn)定性良好,20次重復(fù)測(cè)試所得數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.2%,在室溫下干態(tài)保存,1個(gè)月后電流響應(yīng)為初始響應(yīng)的92%,10個(gè)月后為初始響應(yīng)
4、的59%。 2、采用LDNHS作為固定DNA的載體,在氧化銦錫電極(ITO)表面固定鯡魚精子DNA;通過(guò)紫外.可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),DNA牢固地固定在LDtINS層上,并且結(jié)構(gòu)保持不變;在50 mmol·L<'-1>Tris-HCl緩沖溶液和20 μmol·L<'-1> MB-50 mmol·L<'-1> Tris-HCl緩沖溶液中對(duì)DNA/LDHNS/ITO的電化學(xué)行為進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)DNA/LDHNS/ITO電極可以對(duì)20 μmol
5、·L<'-1> MB-50 mmol·L<'-1> Tris-HCl緩沖溶液中存在的一定量苯酚進(jìn)行檢測(cè),線性范圍為8-48 μmol·L<'-1>;此電極對(duì)四甲基氫氧化銨(TMA)也有一定響應(yīng),響應(yīng)范圍為0-200μmol·L<'-1>。DNA/LDHNS/ITO利用小分子與DNA的非共價(jià)作用對(duì)苯酚進(jìn)行測(cè)試,利用烷化劑與DNA的烷化作用對(duì)TMA進(jìn)行測(cè)試。DNA/LDHNS/ITO重復(fù)測(cè)試10次,所得數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%,在室溫下
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