葵花粕中綠原酸的提取純化及其春抗氧化特性研究.pdf

1、綠原酸(CGA．)具有抗氧化、抑菌、抗突變和消炎作用，對(duì)綠原酸相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)己逐漸深入到食品、保健、醫(yī)藥和日用化工等多個(gè)領(lǐng)域，應(yīng)用前景廣闊。葵花籽仁含有1．1％～4．5％綠原酸，我國(guó)又有豐富的葵粕資源，以葵粕為原料提取綠原酸，不僅使向日葵資源得到綜合開(kāi)發(fā)利用，而且從葵花粕中去除了綠原酸改善了葵花蛋白粉色澤，而提高了葵花籽及葵花粕的利用價(jià)值。
　　 本研究主要從建立一種葵花粕中綠原酸準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便的測(cè)定方法，葵花粕綠原酸提取工藝

2、，大孔吸附樹(shù)脂分離純化葵花粕綠原酸，葵花粕綠原酸提取物成分及抗氧化特性研究等這四個(gè)方面進(jìn)行研究。
　　 在比較分析高效液相色譜法(HPLC)和紫外分光光度法(UV)測(cè)定CGA的基礎(chǔ)上，通過(guò)運(yùn)用Origin8．O數(shù)據(jù)處理分析軟件，建立了一種快速、有效和準(zhǔn)確的CGA檢測(cè)方法。結(jié)果表明：這兩種方法測(cè)定CGA的結(jié)果符合方程：
　　 Y=1．386+0．4082X+0．0132X2-8．438X3，R2=0．9856，其中X為Uv

3、測(cè)定結(jié)果，Y為HPLC測(cè)定結(jié)果，經(jīng)驗(yàn)證，在5．5-33μg/mL濃度范圍內(nèi)，該方程準(zhǔn)確可靠，從而可以采用UV法快速、準(zhǔn)確地測(cè)量大批量樣品中的CGA含量。
　　 綠原酸得率為考察指標(biāo)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用DPS6．55數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件，采用二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，建立了乙醇溶液提取葵花粕綠原酸的二次回歸模型，以綠原酸得率為響應(yīng)值經(jīng)響應(yīng)面分析，確立醇提葵花粕綠原酸的優(yōu)化工藝條件為：提取溫度為75℃，提取時(shí)間為60min，

4、固液比為1：20(W／V)，乙醇濃度為60％(V／V)，綠原酸的提取得率為2．57％(m／m)。
　　 采用大孔吸附樹(shù)脂分離純化綠原酸，通過(guò)分析十種樹(shù)脂的吸附量和解析率，樹(shù)脂NKA-Ⅱ的吸附量和解析率最高，分別可達(dá)到60mg/g的吸附量和77．13％的解析率，因此選擇樹(shù)脂。NKA—Ⅱ?yàn)榭删G原酸純化樹(shù)脂；其靜態(tài)吸附的最佳工藝參數(shù)為：吸附時(shí)間為2h，進(jìn)液pH為3．6，綠原酸進(jìn)樣濃度為8．64rag／mL；通過(guò)大孔樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)和

5、解析試驗(yàn)確定了利用NKA-Ⅱ樹(shù)脂動(dòng)態(tài)純化葵花粕綠原酸的工藝參數(shù)為：洗脫劑為90％乙醇，吸附時(shí)間為8h，洗脫液收集時(shí)間在65．125min之間。將收集到的洗脫液低溫濃縮后真空冷凍干燥，得到純度為36．2％的綠原酸凍干粉。純化前乙醇粗提物的純度僅為16．6％，經(jīng)過(guò)純化后，純度提高了近一倍。綠原酸的回收率達(dá)到。79．6％。
　　 在綠原酸抗氧化功能研究中，通過(guò)考察不同純度的葵花粕綠原酸乙醇粗提取物(粗提品)、標(biāo)準(zhǔn)品以及vc對(duì)DPPH自

6、由基清除率、還原活性、亞鐵離子(Fe2+)鰲合能力、羥自由基(-OH)清除能力指標(biāo)，對(duì)葵花粕綠原酸提取物進(jìn)行了比較全面和系統(tǒng)的抗氧化特性研究。在清除DPPH自由基的試驗(yàn)中，各樣品在不同的濃度時(shí)達(dá)到最大的DPPH自由基清除率96．7％，其中純度為36．2％的NKA-Ⅱ樹(shù)脂純化制品和Vc在不同濃度對(duì)DPPH自由基清除率趨勢(shì)都相近，并且都在濃度為25μg／mL，時(shí)，DPPH自由基的清除率達(dá)9h6．7％；在還原活性試驗(yàn)中，NKA-II樹(shù)脂純化制

7、品和標(biāo)準(zhǔn)品的還原活性接近，在濃度為1251xg／mL．時(shí)，分別相當(dāng)于1 77．861μg/mL和190．89μg/mL的L-cysteine，但是超濾制品和粗提品隨著濃度的增大而還原活性并沒(méi)有明顯的提高。在亞鐵離子螯合試驗(yàn)中，NKA．II樹(shù)脂純化制品和綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的螫合率明顯高于參照組vc和EDTA。在羥自由基的清除試驗(yàn)中，綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品、Vc、NKA-II樹(shù)脂純化制品、超濾制品和粗提品的EC50值(EC50：清除50％的·OH時(shí)，樣品的