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文檔簡介
1、本文以魔芋葡甘露聚糖 (KGM) 為原料,利用甘露聚糖酶和氯乙酸對KGM改性。探討了酶解過程中KGM的摩爾質(zhì)量與酶解時間的關(guān)系和一定摩爾質(zhì)量高取代度的羧甲基葡甘露聚糖(CMKGM)的制備工藝;研究了CMKGM的生物安全性,CMKGM的取代度(DS)、摩爾質(zhì)量與吸濕、保濕之間的關(guān)系,并篩選得到具有最佳保濕效果的CMKGM,拓寬了KGM的應(yīng)用范圍。 在酶解反應(yīng)中,研究反應(yīng)條件對酶活性的影響。結(jié)果表明:甘露聚糖酶的最適pH為5.4;最
2、適溫度為 50℃。反應(yīng)介質(zhì)中乙醇的體積分?jǐn)?shù)小于10%對酶活力影響小;當(dāng)大于20%時,酶幾乎沒有活力。酶解時間對KGM降解產(chǎn)物特性粘度的影響最大,依次是加酶量、反應(yīng)溫度、pH、KGM的濃度。建立了以水為溶劑的條件下KGM的Mark—Houwink方程為[n]=5.3×10<'-2>Mw<'0.69>。在pH為7,1%的KGM條件下,酶解產(chǎn)物的重均摩爾質(zhì)量(Mw)的倒數(shù)與t成線性關(guān)系。 CMKGM制備工藝研究中,以取代度、表觀粘度為
3、指標(biāo),建立了制備一定摩爾質(zhì)量的高DS的CMKGM的實驗室制備條件:反應(yīng)時間(5~6)h、理論取代度(2~3)、氫氧化鈉與氯乙酸摩爾比(2:1~3:1)、反應(yīng)溫度(55~65)℃、液料比(10:1~12:1)mL/g、乙醇體積分?jǐn)?shù)(50~70)%。通過SAS軟件中部分因子設(shè)計法發(fā)現(xiàn)理論取代度、氫氧化鈉與氯乙酸摩爾比、乙醇體積分?jǐn)?shù)對DS的影響顯著,利用響應(yīng)面優(yōu)化得到羧甲基葡甘露聚糖取代度的回歸方程:Y=0.761933+0.052013×X
4、<,1>+0.004675×X<,2>+0.007263×X<,3>-0.038692×X<,1>×X<,1>-0.006075×X<,1>×X<,2>-0.00785×X<,1>×X<,3>-0.130067×X<,2>×X<,2>+0.002225×X<,2>×X<,3>-0.019392×X<,3>×X<,3>(X<,1>理論取代度、X<,2>氫氧化鈉與氯乙酸摩爾比、X<,3>乙醇體積分?jǐn)?shù))CMKGM的紅外光譜圖表明:羧甲基化反應(yīng)
5、中,分子主鏈的一級結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生改變;但發(fā)生了脫乙酰基反應(yīng)。 設(shè)計不同取代度、不同濃度的CMKGM,采用體外培養(yǎng)的方法研究其細(xì)胞毒性。試驗結(jié)果表明:CMKGM細(xì)胞毒性評分為一級,無明顯的細(xì)胞毒性。通過正交試驗確定影響細(xì)胞活性的因素排序為 CMKGM 的濃度>取代度。兩因素方差分析表明CMKGM的濃度對L929細(xì)胞活性影響顯著,取代度的影響不顯著。 實驗還研究CMKGM的摩爾質(zhì)量、DS對吸濕、保濕性能的影響。CMKGM-Ⅲ-
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