強(qiáng)的松對土三七致肝小靜脈閉塞病小鼠肝臟IL-6、IL-8、HSP-70表達(dá)的影響.pdf

1、背景：肝小靜脈閉塞病(VOD/HVOD)在組織學(xué)上以肝小靜脈的非血栓性閉塞為特征，以肝腫大、右上腹疼痛、黃疸和腹水為主要臨床表現(xiàn)。三七有散瘀止痛、補(bǔ)氣攝血的功效，常用于治療跌打損傷、創(chuàng)傷出血、吐血、產(chǎn)后血氣痛等疾病。而研究發(fā)現(xiàn)土三七有肝毒性，土三七可導(dǎo)致HVOD的原因可能和土三七含有吡咯烷生物堿(PAs)有關(guān)，其致病機(jī)制尚未完全明確。文獻(xiàn)報道許多細(xì)胞因子參與了HVOD肝纖維化的發(fā)展，例如IL-6、IL-8、HSP-70等。強(qiáng)的松又名去氫

2、可的松、潑尼松、醋酸潑尼松，是腎上腺皮質(zhì)激素及促腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，具有抗炎、抗過敏、抗風(fēng)濕、免疫抑制作用，強(qiáng)的松治療HVOD有效可能是抑制一些細(xì)胞因子的表達(dá)，例如IL-6、IL-8、HSP-70等，強(qiáng)的松是否通過抑制這些細(xì)胞因子的表達(dá)來阻止HVOD的進(jìn)展尚無文獻(xiàn)報道，本課題將用免疫組化的方法檢測土三七建立HVOD小鼠模型肝臟的IL-6、IL-8和HSP-70的表達(dá)，探討強(qiáng)的松是否通過抑制IL-6、IL-8和HSP-70的表達(dá)來阻止H

3、VOD的發(fā)生、發(fā)展。
　　 方法：將本課題組先前完成的小鼠灌胃建立土三七致肝小靜脈閉塞病的穩(wěn)定動物模型，通過免疫組織化學(xué)方法對試驗動物肝臟及強(qiáng)的松干預(yù)組的試驗動物肝臟行IL-6、IL-8、HSP-70檢測。動物模型建立：115只小鼠隨機(jī)分為4組，土三七組30只(100g土三七熬成藥液，相當(dāng)于生藥1g/mL，每只小鼠按30ml/kg/d予0.6ml灌胃，30天后處理)，空白對照組25只(PBS緩沖液30ml/kg/d，每只小鼠予0

4、.6ml灌胃，30天后處理)，強(qiáng)的松干預(yù)1組30只(強(qiáng)的松片溶于PBS稀釋成1 mg/ml，每只小鼠按5 mg/kg/d每次給0.1ml灌胃，與土三七30 ml/kg/d同時灌胃，30天后處理)，強(qiáng)的松干預(yù)2組30只(強(qiáng)的松片溶于PBS稀釋成1mg/mL，每只小鼠按10 mg/kg/d每次給0.2ml灌胃，與土三七30 ml/kg/d同時灌胃，30天后處理)。利用土三七煎液，對小鼠灌胃建立土三七致肝小靜脈閉塞病的穩(wěn)定動物模型。本實驗留取

5、動物模型的肝臟組織制作病理切片，并通過二步法免疫組織化學(xué)方法對小鼠肝小靜脈閉塞病動物模型及強(qiáng)的松干預(yù)組的試驗動物肝臟行IL-6、IL-8、HSP-70檢測，數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果：土三七組小鼠動物模型符合HVOD表現(xiàn)，光鏡下觀察土三七組小鼠動物模型肝臟標(biāo)本，病理特征也符合肝小靜脈閉塞病的病理特點。免疫組化檢測結(jié)果：土三七動物模型組小鼠的肝組織中IL-6、HSP-70的水平明顯高于空白對照(30.

6、99±14.49vs93.42±9.25，29.62±1.91vs140.00±12.68)，在強(qiáng)的松干預(yù)1組及2組，IL-6、HSP-70的水平不升高，且不同劑量干預(yù)組之間無明顯差異，而IL-8的水平在PBS空白對照組中為最高。
　　 結(jié)論：本實驗利用己建立的土三七煎液灌胃誘導(dǎo)小鼠HVOD模型，通過免疫組化檢測，對各組小鼠肝臟IL-6、IL-8和HSP-70免疫組化檢測比較，模型組小鼠IL-6、HSP-70的表達(dá)是明顯增高，提