過氧化物酶增殖物激活受體γ和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-lc在非灑精性脂肪肝大鼠肝組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 觀察過氧化物酶增殖物激活受體γ(PPARγ)和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表達(dá)變化,以探討二者在NAFLD形成過程中的相互作用及可能機(jī)制。
　　 方法：
　　 40只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組予以40％CCL4皮下注射每周2次和高脂飼料復(fù)合喂食以獲得NAFLD大鼠模型,運(yùn)用酶法分析各組在2、4、6、8周4個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(

2、ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)的水平、ELISA方法檢測(cè)各觀察點(diǎn)腫瘤壞死因子(TNF-α)水平,用免疫組化方法及RT-PCR方法分析肝組織PPARγ和SREBP-1c的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、隨著造模時(shí)間延長,實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟脂肪變?cè)絹碓矫黠@,血清ALT、AST、TG、TC逐漸升高,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 2、在實(shí)驗(yàn)組大鼠肝細(xì)胞中TNF-

3、α從第2周起就開始有較弱表達(dá),隨造模時(shí)間延長表達(dá)逐漸增強(qiáng),與對(duì)照組相比有顯著性差異(p＜0.05)。
　　 3、免疫組化染色結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組SREBP-1c早期表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中,第2周末即可見棕黃色顆粒此種表達(dá)隨造模時(shí)間延長而增強(qiáng),并強(qiáng)于對(duì)照組(p＜0.05),至第8周末細(xì)胞質(zhì)中可見大量棕褐色顆粒沉積,同時(shí)大部分細(xì)胞核也呈陽性著色(p＜0.05)。而實(shí)驗(yàn)組PPARγ在4周末表達(dá)方開始增強(qiáng),肝細(xì)胞質(zhì)中棕黃色顆粒增多。隨著肝細(xì)胞脂肪變

4、性程度加重,PPARγ表達(dá)增強(qiáng),第8周末細(xì)胞質(zhì)中可見大量棕褐色顆粒沉積(p＜0.05)。
　　 5、RT-PCR檢測(cè)到2周末實(shí)驗(yàn)組大鼠肝組織SREBP-1c mRNA轉(zhuǎn)錄開始增多,隨著造模時(shí)間延長而增強(qiáng),與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。而RT-PCR檢測(cè)大鼠肝臟PPARγ的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn):實(shí)驗(yàn)組各組間PPARγ mRNA從4周開始表達(dá)增加,此時(shí)mRNA轉(zhuǎn)錄與對(duì)照組比較明顯增多,隨脂肪肝程度的加重逐漸增強(qiáng),與對(duì)照組相比

5、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 6、隨著脂肪肝造模時(shí)間延長,炎癥壞死逐漸明顯,肝損害逐漸加重。實(shí)驗(yàn)組大鼠ALT、AST、TG及TC逐漸升高,血清TNF-α亦呈上升趨勢(shì)。統(tǒng)計(jì)相關(guān)分析顯示血清TNF-α與ALT、AST、TG、TC呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.782、P＜0.05;0.863、P＜0.05;0.356、P＜0.05;0.786、P＜0.05。相關(guān)性分析RT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)SREBP-1c、PPAR.γ呈正相關(guān)

6、關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r=0.951,P＜0.05。進(jìn)一步分析SREBP-1c、PPARγ的RT-PCR.結(jié)果與血清TNF-α結(jié)果亦呈正相關(guān),TNF-α與SREBP-1c、PPARγ相關(guān)系數(shù)分別為0.922、0.903(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、PPARγ和SREBP-1c、TNF-α可作為敏感的指標(biāo)反映非酒精性脂肪肝的發(fā)生及發(fā)展情況。
　　 2、PPARγ和SREBP-1c與肝細(xì)胞病變程度有很好的一致性