普瑞巴林結(jié)構(gòu)確證及質(zhì)量研究.pdf

1、普瑞巴林是一種新型γ-氨基丁酸(GABA)受體激動劑,用于治療神經(jīng)性疼痛,局部發(fā)作性癲癇和焦慮癥。2004年12月美國食品與藥品管理局(FDA)批準用于治療糖尿病性周圍神經(jīng)病變的神經(jīng)性疼痛和帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛。其作用機制是作為配體與α2-δ亞基結(jié)合,后者與電壓依賴性鈣通道有關(guān),通過調(diào)節(jié)鈣通道減少鈣離子進入神經(jīng)末梢,使幾種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)釋放減少。在血中不與血漿蛋白結(jié)合,也無肝代謝,通過腎臟排泄,起效快,副作用小且時間短,多數(shù)病人可以耐受。

2、普瑞巴林為S構(gòu)型光學手性化合物,目前尚未在國內(nèi)市場上市,也未被國內(nèi)外藥典收載。本文對重慶醫(yī)藥工業(yè)研究院試制的普瑞巴林(以下簡稱“本品”)進行系統(tǒng)的質(zhì)量研究,為科學制定其質(zhì)量控制標準提供了依據(jù)。重慶醫(yī)藥工業(yè)研究院采用自行設計的合成路線得到具有結(jié)晶形態(tài)的普瑞巴林,本文采用紫外(UV)、紅外(IR)、質(zhì)譜(MS)、核磁共振譜(H-NMR,C-NMR)等波譜技術(shù)確證了結(jié)構(gòu),以國外樣品為對照通過HPLC柱前手性衍生化方法確定了其構(gòu)型;并重點對本品

3、的有關(guān)物質(zhì)、光學異構(gòu)體、殘留溶劑和含量測定進行了系統(tǒng)的評價研究。有關(guān)物質(zhì)測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Aichrombond AQ C18),以磷酸鹽緩沖溶液(取磷酸二氫鉀0.12g、磷酸氫二鈉0.56g,加水1000ml溶解)-乙腈(95:5)為流動相,檢測波長為205nm,理論板數(shù)按普瑞巴林峰計算應不低于1500。該測定條件能與中間體,以及酸、堿、氧化破壞的的降解產(chǎn)物能完全分離。本品合成工藝中使用了二氯甲烷、四氫呋喃、甲苯、異

4、丙醇、異戊醛、乙酸乙酯和丙二酸二乙酯。根據(jù)ICH(人用藥物注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會)和中國藥典的相關(guān)技術(shù)要求,采用氣相色譜法進行了研究,各溶劑達到很好的分離,滿足其殘留溶劑的測定要求。利用Na-(5-氟-2,4-二硝基苯基)-L-丙胺酰胺(FDNPAA)為柱前手性衍生化試劑,該試劑的摩爾比在2.96以上與普瑞巴林可定量反應生成的化合物可用普通色譜柱分離測定普瑞巴林中的光學異構(gòu)體。最佳色譜條件為Inertsil ODS-2柱(5μm,250

5、mmx4.6mm),流動相為三乙胺緩沖液(取三乙胺7.0ml,加水1000ml,用磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-乙腈(55:45,V/V),紫外檢測波長為340nm。普瑞巴林光學異構(gòu)體衍生物的色譜峰分離度大于4、最小檢測限為3.79x10-8g/ml(S/N=3),該法準確、可靠,適用于普瑞巴林或普瑞巴林制劑的質(zhì)量控制。含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Aichrombond AQ C18),以磷酸鹽緩沖溶液(取磷酸二氫鉀0.12

6、g、磷酸氫二鈉0.56g,加水1000ml溶解)-乙腈(95:5)為流動相,檢測波長為205nm。建立了普瑞巴林含量的測定方法,所建立的檢查方法具有良好的專屬性,最小檢出濃度為1.890×10-7(g/ml),在0.2082～1.6656mg/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,線性方程為A=1730.20C+4.608(其中:A-HPLC圖中主峰峰面積,C-樣品溶液濃度),相關(guān)系數(shù)為1.0。方法精密度RSD為0.3％。在以上研究的基礎上,制定了