利用HSV-tk研制肝臟特異損傷的轉(zhuǎn)基因小鼠模型研究.pdf

1、本研究首先克隆了小鼠血清白蛋白基因啟動子(ALBgenepromoter，Palb)與增強(qiáng)子(ALBgeneenhancer，Ealb)，構(gòu)建了受其調(diào)控的5種表達(dá)載體，然后在細(xì)胞水平分析比較載體的轉(zhuǎn)錄活性或殺傷能力，選擇出了細(xì)胞水平活性較高的載體進(jìn)行轉(zhuǎn)基因小鼠雄原核顯微注射，獲得了目的基因HSV-tk整合與特異表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠品系。進(jìn)一步通過尾靜脈注射GCV誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟損傷，以四氯化碳(carbontetrachloride，CC

2、l4)損傷小鼠為對照觀察疾病的進(jìn)程。通過血液的生化檢查，肝臟與腎臟等組織的病理形態(tài)學(xué)分析來研究轉(zhuǎn)基因小鼠的損傷效應(yīng)。本研究為肝病轉(zhuǎn)基因動物模型的建立，為探討肝病的發(fā)病機(jī)制、病理生理過程、病理形態(tài)改變及藥物防治等研究開拓了廣闊的前景。　　本研究通過參閱文獻(xiàn)，將查閱到的小鼠血清白蛋白基因調(diào)控元件功能區(qū)與GenBank小鼠基因組序列進(jìn)行同源比較，從而確定我們需要克隆的區(qū)域。利用巢式PCR擴(kuò)增Palb，利用可信度極高的TaqDNA聚合酶(Py