Transthyretin化學(xué)修飾在輔助診斷肺癌和肺感染中的作用研究.pdf

1、目的:肺癌死亡率逐年增加，在我國(guó)已經(jīng)上升到第一位，其臨床表現(xiàn)常與肺感染性疾病類似。實(shí)驗(yàn)室輔助檢查在早期鑒別肺癌和肺感染中具有重要作用，其中研究最多的是腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，但尚無一種標(biāo)志物能特異性輔助診斷肺癌，因此我們期望尋求其他的指標(biāo)在腫瘤標(biāo)志物的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步加強(qiáng)輔助診斷。轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(transthyretin，TTR)因其半衰期短且主要來源于肝臟，被用作評(píng)價(jià)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和感染的指標(biāo)。此外，TTR又因其基因的表達(dá)對(duì)細(xì)胞因子白介素1、白介

2、素6和腫瘤壞死因子敏感，而被稱為急性負(fù)性時(shí)相反應(yīng)蛋白。本研究旨在選擇生物標(biāo)志物的合理組合方式并結(jié)合轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白的質(zhì)譜結(jié)果，探討提高鑒別診斷肺癌和肺感染的特異性和敏感性，指導(dǎo)肺癌和肺感染的實(shí)驗(yàn)室診斷。
　　 方法:
　　 (1)收集肺癌（95例，包含鱗狀上皮細(xì)胞肺癌35例、腺細(xì)胞肺癌30例和小細(xì)胞肺癌30例），肺感染患者（22例，包括化膿性肺感染性疾病患者10例和肺結(jié)核12例），采集血清和胸腔積液用于測(cè)定生物化學(xué)指標(biāo)含量

3、和TTR的質(zhì)譜分析。健康對(duì)照組50例，采集血清用于測(cè)定生物化學(xué)標(biāo)志物和TTR蛋白質(zhì)譜分析。
　　 (2) TOSHIBA TBA-120FR型全自動(dòng)化生化分析儀及配套試劑，分別測(cè)定血清和胸腔積液甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、葡萄糖(Glu)腺苷酸(ADA)和乳酸脫氫酶(LDH)七項(xiàng)生物化學(xué)標(biāo)志物含量。
　　 (3) TOSHIBA TBA-40型自動(dòng)分析儀，免疫比濁法分別測(cè)定血清和

4、胸腔積液ApoA-1、ApoB和轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白含量。
　　 (4)用羅氏2010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)型分析儀檢測(cè)CYFRA-21和NSE。雅培ARCHITECTi2000SR全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)CEA、CA125和CA199的含量。
　　 (5)利用MALDI-TOF-MS法分別分析健康對(duì)照組，肺癌和肺感染組血清和胸腔積液中TTR蛋白化學(xué)修飾類型，并計(jì)算發(fā)生修飾比例。
　　 結(jié)果:
　　 第一

5、部分 TTR在輔助診斷肺癌中的作用
　　 (1)肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物CEA，CYFRA-21、CA125、CA199和NSE含量均明顯高于健康對(duì)照組，其陽性率在13.3％-48.6％之間，且各病理類型存在差異。臨床常用聯(lián)合檢測(cè)來提高檢出率，但是結(jié)果發(fā)現(xiàn)疊加項(xiàng)目越多陽性率越低。兩項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)在鱗痛組、腺癌組和小細(xì)胞肺癌組靈敏度均大于80％，三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)在鱗癌組靈敏度大于70％，在腺癌組靈敏度大于60％，而四項(xiàng)和五項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)

6、定其陽性檢出率明顯減少。
　　 (2)肺癌組血清和健康對(duì)照組血清比較，有6項(xiàng)生化指標(biāo)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中肺癌組脂質(zhì)和脂蛋白成分明顯低于健康對(duì)照組血清，其次為蛋白指標(biāo)，其中TTR差異最為明顯。而LDH比值增高，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)肺癌組和健康對(duì)照組血清和胸水TTR蛋白均發(fā)現(xiàn)4個(gè)TTR蛋白峰，其中包括3種主要修飾類型，并且患者胸水內(nèi)cysgly-TTR修飾類型比例比正常血清和肺癌組血清明顯

7、增高。
　　 第二部分探討輔助診斷肺癌與肺感染的生物標(biāo)志物
　　 (1)比較肺癌與肺感染患者之間血清生物標(biāo)志物，發(fā)現(xiàn)TC、ApoA-1和TTR三項(xiàng)標(biāo)志物具有顯著性差異，肺癌組明顯高于肺感染組。而兩組胸腔積液中僅TTR和ADA存在顯著性差異。
　　 (2)分析肺癌組和肺感染組血清及胸腔積液中TTR化學(xué)修飾，發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清及胸腔積液TTR蛋白均可見sul-TTR，cys-TTR和cysgly-TTR三種修飾類型。肺

8、感染患者組僅出現(xiàn)sul-TTR和cys-TTR兩種修飾峰。
　　 結(jié)論:
　　 (1)肺癌患者血清CEA，CYFRA-21、CA125、CA199和NSE聯(lián)合檢測(cè)能夠提高檢出率。逐項(xiàng)疊加檢測(cè)提高檢測(cè)特異性，但是靈敏性降低，綜合考慮三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)適合鑒別肺癌。
　　 (2)肺癌和肺感染組血清和胸腔積液中均有TTR存在差異性表達(dá)，可有作為肺癌和肺感染輔助檢查指標(biāo)的可能。
　　 (3)肺癌血清和胸腔積液TTR能夠