MCI-186拮抗Aβ神經(jīng)毒性作用的研究.pdf

1、目的:β-淀粉樣肽(amyloid-β-pepfide:Aβ)的神經(jīng)毒性被認(rèn)為是阿爾茨海默病(AD)形成的主要因素。本室前期研究表明,可溶性寡聚化的AD可以激活MLK3-MKK7-JNK3信號(hào)通路,并在Aβ25-35作用的12 h有一活化高峰,JNK的激活在AD誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡中起著關(guān)鍵性作用。本實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)的皮質(zhì)神經(jīng)元,研究自由基清除劑MCI-186(依達(dá)拉奉)拮抗Aβ神經(jīng)毒性的作用及機(jī)制,以闡明Aβ神經(jīng)毒性的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,并為A

2、D治療藥物的篩選提供理論依據(jù)。
　　 方法:采用SD大鼠原代培養(yǎng)的皮質(zhì)神經(jīng)元,經(jīng)Aβ25-35作用后作為AD的細(xì)胞模型。給予MCI-186后,應(yīng)用DAPI染色進(jìn)行凋亡的檢測(cè);應(yīng)用免疫印跡、免疫沉淀檢測(cè)MLK3、MKK7和JNK3的磷酸化(活化)和表達(dá)情況;應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)觀察p-JNKs向細(xì)胞核的轉(zhuǎn)位和c-Jun的磷酸化。
　　 結(jié)果:
　　 1、DAPI染色結(jié)果顯示,MCI-186對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的神經(jīng)元損

3、傷具有保護(hù)作用,以20 mol/L作用最強(qiáng)。
　　 2、免疫印跡、免疫沉淀結(jié)果顯示,MCI-186可以抑制Aβ25-35引起的MLK3、MKK7、JNK3的活化。
　　 3、免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示,MCI-186減少Aβ25-35引起的JNKs核轉(zhuǎn)位和p-c-Jun水平的升高。
　　 結(jié)論:
　　 1、MCI-186對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用,以20μmol/L作用最強(qiáng)。
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