中暑所致大鼠門(mén)靜脈高壓及其臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　 門(mén)靜脈高壓癥(portal hypertension)是由不同因素引起的門(mén)靜脈血流受阻、血液淤滯和/或血流量增加而導(dǎo)致門(mén)靜脈系統(tǒng)壓力增高。門(mén)靜脈內(nèi)的血液主要來(lái)自于胃、腸、脾和胰,血液由門(mén)靜脈分支進(jìn)入肝血竇,再由肝靜脈匯入下腔靜脈,門(mén)靜脈高壓并非一種獨(dú)立的疾病,所有能影響流出道受阻的因素均有可能形成門(mén)靜脈高壓。其突出的臨床表現(xiàn)為食管中下段、胃底靜脈曲張破裂出血,脾腫大、脾功能亢進(jìn)、胃粘膜病變及腹水形成等。正常人

2、門(mén)靜脈壓力為13-24cmH2O,在生理情況下能有相當(dāng)大的波動(dòng),但這種波動(dòng)是短暫的,不會(huì)引起內(nèi)臟循環(huán)的病理性變化。門(mén)靜脈高壓癥時(shí),壓力大都增至30-50 cmH2O。門(mén)靜脈高壓是一類(lèi)嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的疾病,自然預(yù)后差,隨著對(duì)其認(rèn)識(shí)的提高及檢查手段的不斷完善,大量的病例被診斷出來(lái)。近20年來(lái),隨著基礎(chǔ)研究的不斷深入,諸多學(xué)科如消化內(nèi)鏡學(xué)、介入放射學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)等的許多學(xué)者,從不同領(lǐng)域,博采眾長(zhǎng),參與到門(mén)靜脈高壓癥的研究中,涌現(xiàn)出了許多新理

3、論、新技術(shù)和新進(jìn)展。通常門(mén)靜脈高壓本身難以治愈,現(xiàn)在多傾向于對(duì)其并發(fā)癥的處理,特別是對(duì)上消化道大出血的治療。根據(jù)病人的情況一般采用藥物、內(nèi)鏡、介入放射學(xué)和外科手術(shù)的綜合性治療。臨床上內(nèi)鏡治療與藥物治療方面取得了一些突破性進(jìn)展,但在手術(shù)治療方面,雖然手術(shù)方法繁多,對(duì)此病癥尚缺少一種理想的的方法。門(mén)靜脈高壓癥的手術(shù)方式隨著時(shí)代的發(fā)展,也在不斷地、螺旋式的前進(jìn),諸多的手術(shù)方法可分為分流術(shù)和斷流術(shù)及二者的結(jié)合與脾臟切除術(shù)。門(mén)靜脈高壓癥手術(shù)治療的

4、效果、預(yù)后在很大程度上取決于患者肝臟的儲(chǔ)備功能。肝功能良好者,治療效果較好,反之,則療效較差,預(yù)后不良。根據(jù)肝功能代償狀態(tài)的評(píng)定結(jié)果指導(dǎo)選擇合理的手術(shù)或非手術(shù)治療方式、正確預(yù)測(cè)患者的預(yù)后和治療效果,在臨床上具有非常重要的意義。目前國(guó)際通行的肝功能分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為Child-Pugh分級(jí)法。門(mén)靜脈高壓的病因繁多,發(fā)病機(jī)理復(fù)雜,在百余年來(lái)的研究及實(shí)踐中對(duì)門(mén)靜脈高壓癥的發(fā)生發(fā)展有了較為深刻的認(rèn)識(shí)。我國(guó)是乙型肝炎病毒感染高發(fā)區(qū),在我國(guó)肝炎后肝硬化所致

5、的門(mén)靜脈高壓最為常見(jiàn)。非硬化性門(mén)靜脈高壓(NCPH)、肝小靜脈閉塞病(VOD)及布-加綜合征(BCS)都可致門(mén)靜脈高壓,且都涉及到肝臟血管病變所引起的門(mén)靜脈高壓,但具體病因尚不十分清楚,多傾向于農(nóng)業(yè)人群,似為農(nóng)業(yè)相關(guān)性疾病。夏秋季戶(hù)外勞動(dòng)容易導(dǎo)致中暑,造成機(jī)體組織受熱力損傷,而有文獻(xiàn)報(bào)道肝臟是熱力的主要損傷部位。查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),少有熱力對(duì)肝臟的損傷相關(guān)報(bào)道,我們用大鼠制作了中暑模型以研究在中暑時(shí)大鼠的凝血狀態(tài)、肝臟血管及門(mén)靜脈壓力的變化

6、及其意義。
　　 材料與方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)共分兩個(gè)部分進(jìn)行:
　　 (1)急性高熱條件大鼠中暑模型:觀察急性高熱條件下大鼠門(mén)靜脈壓力、凝血狀態(tài)變化、血漿內(nèi)毒素水平變化及肝臟形態(tài)學(xué)改變。
　　 雄性普通級(jí)Wistar大鼠20只,體重為90-100g,隨機(jī)分為2組:A組(10只),為正常對(duì)照組；B組(10只),為實(shí)驗(yàn)組。置入溫度控制箱內(nèi),溫度控制器維持箱內(nèi)溫度為(42±0.5)℃、相對(duì)濕度為(40±5)％,

7、持續(xù)100分鐘,用沾石蠟油的體溫計(jì)測(cè)大鼠肛溫達(dá)43℃進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)階段。在誘導(dǎo)急性高熱中暑模型時(shí),觀察動(dòng)物的活動(dòng)和對(duì)外界刺激的反應(yīng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)記錄動(dòng)物情況。將實(shí)驗(yàn)組置于溫度箱外,室溫下10分鐘,5％苯巴比妥(7ml/kg,腹腔內(nèi)注射)麻醉,沿大鼠腹正中剪開(kāi)腹壁,經(jīng)門(mén)靜脈插管用肝素鹽水測(cè)門(mén)靜脈壓力(PVP)并記錄,顯露心臟,5ml注射器右心房抽血,備用測(cè)PT全套及血漿內(nèi)毒素濃度；分別離斷上下腔靜脈,完整取下肝臟標(biāo)本行大體觀察,隨后取第

8、二肝門(mén)處肝組織10％福爾馬林液固定保存,用于病理學(xué)檢查。
　　 (2)慢性高熱條件大鼠中暑模型:觀察慢性高熱條件下大鼠門(mén)靜脈壓力變化及肝臟形態(tài)學(xué)改變。
　　 雄性普通級(jí)Wistar大鼠50只,體重90-100g,隨機(jī)分為2組:C組(10只),為正常對(duì)照組；D組(40只),為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組飼養(yǎng)在動(dòng)物房?jī)?nèi),自由進(jìn)食飲水,每次實(shí)驗(yàn)前12小時(shí)禁食,自由飲水,待大鼠安靜后實(shí)驗(yàn)組置入溫度控制箱內(nèi),溫度控制器維持箱內(nèi)溫度為(42±0.

9、5)℃、相對(duì)濕度為(40±5)％,持續(xù)100分鐘,體溫計(jì)測(cè)肛溫達(dá)43℃進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)階段。上述步驟實(shí)驗(yàn)造模1周1次,連續(xù)4周。每次實(shí)驗(yàn)后稱(chēng)大鼠體重,根據(jù)大鼠體重下降程度皮下注射適量生理鹽水(體重下降1g補(bǔ)充生理鹽水1-2ml),進(jìn)行補(bǔ)液治療,每次實(shí)驗(yàn)后并給予水浴降溫。4次結(jié)束后存活大鼠在動(dòng)物房?jī)?nèi)繼續(xù)飼養(yǎng)4周。在誘導(dǎo)慢性高熱中暑模型時(shí),觀察動(dòng)物的活動(dòng)和對(duì)外界刺激的反應(yīng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)記錄動(dòng)物的死亡情況。8周末,5％苯巴比妥(7ml/kg,

10、腹腔內(nèi)注射)麻醉,沿大鼠腹正中剪開(kāi)腹壁,經(jīng)門(mén)靜脈插管用肝素鹽水測(cè)門(mén)靜脈壓力(PVP)并記錄,顯露心臟,剪開(kāi)右心房,用注射器將40ml生理鹽水由門(mén)靜脈緩慢注入,沖出肝內(nèi)淤血后分別離斷上下腔靜脈,完整取肝臟標(biāo)本行大體觀察,隨后取第二肝門(mén)處肝組織10％福爾馬林液固定保存,用于病理學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：
　　 ①急性高熱條件大鼠中暑模型:正常對(duì)照組大鼠狀態(tài)良好,毛發(fā)光澤度好,靈活好動(dòng)。實(shí)驗(yàn)組狂躁,相互攻擊,便溺,隨后精神萎靡,嗜

11、睡,對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍；實(shí)驗(yàn)組門(mén)靜脈壓力為(7.69±0.843)cmH2O,正常對(duì)照組大鼠門(mén)靜脈壓力為(6.75±0.92)cmH2O、兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組凝血四項(xiàng)結(jié)果分別為PT21.2±4.8s、PT-INR1.91±0.56、PT-％43.5±16.42％、FIB3.11±1g/t,,對(duì)照組凝血四項(xiàng)結(jié)果分別為PT16.1±0.32 s、PT-INR1.29±0.04、PT-％67.5±1.97％、FIB1

12、.87±0.68 g/L,差異顯著(P<0.05).內(nèi)毒素(LPS)含量?jī)山M無(wú)顯著差異；對(duì)照組大鼠肝臟質(zhì)地柔軟濕潤(rùn),表面光滑。實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟淤血明顯,色澤發(fā)暗,表面可見(jiàn)散在淤血點(diǎn)。HE染色可見(jiàn):對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)完整,肝細(xì)胞排列整齊,匯管區(qū)清楚。實(shí)驗(yàn)組肝內(nèi)小靜脈、肝竇均擴(kuò)張淤血明顯,胞漿疏松,部分血管有紅細(xì)胞外滲,肝板內(nèi)可見(jiàn)水樣變性肝細(xì)胞,血管周?chē)幸粤馨图?xì)胞為主的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　 ②慢性高熱條件大鼠中暑模型:正常對(duì)照組大鼠狀

13、態(tài)良好,毛發(fā)光澤度好,食量正常,大小便無(wú)異常,體重上升平穩(wěn),至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)達(dá)200-220g,無(wú)動(dòng)物死亡。實(shí)驗(yàn)組活動(dòng)逐漸減少,精神萎靡,有相互攻擊,群鼠分食死鼠現(xiàn)象,對(duì)外界刺激反應(yīng)較為遲鈍,食欲不振,嗜睡,毛發(fā)蓬亂而少光澤,體重上升較對(duì)照組慢,至實(shí)驗(yàn)?zāi)┻_(dá)180-210g,至實(shí)驗(yàn)?zāi)?shí)驗(yàn)組大鼠死亡26只；實(shí)驗(yàn)組大鼠門(mén)靜脈壓力(10.46±1.635)cmH2O,正常對(duì)照組大鼠門(mén)靜脈壓力(6.95±0.497)cmH2O,兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

14、(P<0.01)；對(duì)照組大鼠肝臟質(zhì)地柔軟濕潤(rùn),表面光滑,色澤均勻暗紅。對(duì)照組大鼠肝臟質(zhì)地柔軟濕潤(rùn),表面光滑,色澤均勻暗紅,富有彈性。實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟體積腫大,色澤較暗,肝臟表面有散在淤血點(diǎn),部分肝組織呈紅白相間。HE染色:光鏡下,對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)完整,肝細(xì)胞排列整齊,匯管區(qū)清楚。實(shí)驗(yàn)組肝內(nèi)小靜脈、肝血竇擴(kuò)張明顯,肝細(xì)胞胞漿疏松,部分血管周?chē)屑t細(xì)胞外滲情況較急性實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛧?yán)重,血管內(nèi)皮細(xì)胞增生生芽,小葉間靜脈血栓形成,肝板內(nèi)水樣變性肝細(xì)胞數(shù)