富血小板血漿促進(jìn)組織工程皮膚創(chuàng)面修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的：構(gòu)建裸鼠背部創(chuàng)面模型,在此基礎(chǔ)上研究富血小板血漿促進(jìn)組織工程皮膚創(chuàng)面修復(fù)的情況。
　　實(shí)驗(yàn)方法：采集24位志愿者抗凝靜脈血,利用密度梯度法,制備富血小板血漿,用全血細(xì)胞分析儀檢測其血小板含量,并經(jīng)激活劑激活后,用ELISA測定其中的生長因子濃度。利用裸鼠背部創(chuàng)面的模型,通過人工真皮組(A組)、組織工程皮膚組(B組)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子組織工程皮膚組(C組)、表皮細(xì)胞生長因子組織工程皮膚組(D組)、富生長因子組織工程皮

2、膚組(E組)的不同處理干預(yù),觀察實(shí)驗(yàn)第3、7、14、2l天分別取材活檢,行HE染色、PAS染色,PAN-CK、Vimentin、CKl5、CD29免疫組化學(xué)檢查等,比較其修復(fù)效果。
　　研究結(jié)果：制備的富血小板血漿中的血小板濃度是靜脈血的4.5倍。PRP中的生長因子濃度高于全血中的生長因子濃度。不同處理干預(yù)方法對裸鼠背部創(chuàng)面的修復(fù)效果,E組大體觀察創(chuàng)面感染率最低,肉芽組織生長較快,新生表皮較厚,愈合率最高。HE染色示E組創(chuàng)面中血管

3、分布密度、膠原排列及新生表皮各層結(jié)構(gòu)排列優(yōu)于其他4組。PAN-CK免疫組化染色示E組表皮細(xì)胞排列整齊,分化成度優(yōu)于D組。Vimentin免疫組化染色見C組真皮層成纖維細(xì)胞排列規(guī)律并優(yōu)于E組。CKl5、CD29免疫組化染色除人工真皮組皆有陽性細(xì)胞表達(dá),提示有表皮干細(xì)胞生長。
　　結(jié)論：應(yīng)用梯度離心法可成功制備富血小板血漿,其含有多種高濃度生長因子。富生長因子組織工程皮膚組的修復(fù)效果最好,堿性成纖維細(xì)胞生長因子組織工程皮膚組和表皮生長