GC-MS法測定人體尿液中合成類固醇類藥物及其代謝物的研究.pdf

1、目的：建立用GC/MS法對陽性尿樣中睪酮、諾龍、去氫甲基睪酮及其代謝物的定性定量的分析方法，確定藥物原型、代謝物的特征離子及其代謝．時間曲線，依照IOC-MC的判定標(biāo)準(zhǔn)，建立相應(yīng)的陽性確證方法。 方法：(1)對尿液依次采用C<,18>柱固相萃取技術(shù)、β-葡萄糖醛酸苷酶(從大腸桿菌中提取)水解法以及N-甲基-N三甲基硅基三氟乙酰胺(MSTFA)衍生手段進(jìn)行處理。(2)利用GC/MS對空白尿樣與陽性尿樣中的待測物進(jìn)行全譜掃描，找到藥

2、物原型或其代謝物的特征離子，再采用選擇離子的方法，確定其最低檢測限及代謝曲線。 結(jié)果：(1)專屬性試驗表明確定的方法對檢測睪酮、表睪酮、諾龍、去氫甲基睪酮和內(nèi)標(biāo)物甲基睪酮無干擾。(2)睪酮、表睪酮在5～400ng/mL的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.9993，最低定量下限均為5ng/mL。(3)睪酮和表睪酮的提取回收率分別為80.14～82.60％和81.44～82.63％。(4)睪酮、表睪酮的日內(nèi)、日間精密度的相

3、對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于7.64％，準(zhǔn)確度分別在98.6～105.3％和101.3～106.9％之間。(5)睪酮、表睪酮衍生物溶液在48h內(nèi)基本穩(wěn)定。(6)用保留時間和特征離子確定睪酮、表睪酮、諾龍代謝物、去氫甲基睪酮原形及其兩種代謝物，并以此確定了陽性尿樣的判定方法。 結(jié)論：建立了用GC/MS法對陽性尿樣中睪酮、諾龍、去氫甲基睪酮及其代謝物的定性定量分析方法，該法具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、精密度及準(zhǔn)確度好的特點，可用于違規(guī)運(yùn)動員尿樣的檢