消癥丸對C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡及對p53表達(dá)影響的實驗研究.pdf

1、目的：運用血清藥理學(xué)方法，從細(xì)胞凋亡方面研究消癥丸抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的作用機制，為其臨床應(yīng)用提供理論和實驗依據(jù)?！　》椒ǎ喊凑昭逅幚韺W(xué)方法的要求制備含藥血清：用不同劑量消癥丸制成水溶液給大鼠灌胃，制備大、中、小劑量消癥丸含藥血清；并用相同的方法同時制備生理鹽水對照血清。以大、中、小劑量消癥丸含藥血清和空白對照血清分別作用于大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞：采用臺盼蘭染色繪制生長曲線、MTT法、倒置相差顯微鏡觀察消癥丸含藥血清對C6細(xì)胞生長的抑制作

2、用；電鏡、流式細(xì)胞儀、免疫熒光、免疫組化測p53蛋白表達(dá)觀察C6細(xì)胞凋亡情況?！　〗Y(jié)果：大、中劑量消癥丸含藥血清能明顯抑制C6細(xì)胞生長，其腫瘤細(xì)胞殺傷率最高可達(dá)79.47％，與對照組有非常顯著性差異(p＜0.01)，大、中劑量組之間及小、空白劑量組之間無顯著性差異，用藥48h與24h相比有非常顯著性差異(p＜0.01)；經(jīng)過含藥血清處理作用后的大、中劑量C6細(xì)胞出現(xiàn)明顯退行性變，由貼壁生長而逐漸脫落，細(xì)胞變圓，體積縮小、浮起、細(xì)胞間出

3、現(xiàn)明顯空隙；透射電鏡下可見含藥血清組細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)凋亡特征；流式細(xì)胞儀檢測消癥丸含藥血清組凋亡率明顯高于空白對照組，呈濃度依賴性；免疫熒光示C6細(xì)胞內(nèi)有p53蛋白表達(dá)；免疫組化結(jié)果顯示大、中劑量含藥血清組p53蛋白表達(dá)均較空白、小劑量組明顯減少，且大、中劑量組之間及空白、小劑量組之間無顯著性差異?！　〗Y(jié)論：本實驗提示消瘢丸含藥血清具有一定的抗膠質(zhì)瘤作用，并與用藥劑量、時間存在一定關(guān)系。其機制可能是通過抑制癌細(xì)胞的增殖，同時下調(diào)p53蛋白表