糖尿病腎病患者MIOX的表達及其臨床意義研究.pdf

1、研究背景
　　糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病微血管并發(fā)癥的重要類型，也是引起終末期腎臟疾病(end stage renal disease，ESRD)的主要病因（約占40％-50％）。糖尿病腎病發(fā)病機制復雜，已有大量研究證實多元醇通路活性增高、糖基化終末產(chǎn)物形成增加、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)和RAS系統(tǒng)激活、GTP酶蛋白的活性變化、TGF-β-Smad信號通路的激

2、活等細胞分子信號轉(zhuǎn)導途徑異常均參與了糖尿病腎病的發(fā)生與進展，但其具體的發(fā)病機制尚不完全清楚。目前臨床常用針對上述單個因素及信號轉(zhuǎn)導分子的治療干預措施如PKC抑制劑等療效有限。因此深入開展糖尿病腎病分子發(fā)病機制的研究，尋找糖尿病腎病新的治療靶點，一直是國內(nèi)外腎臟病學界研究領域的熱點，具有重要的科學和社會意義。
　　傳統(tǒng)觀念認為腎小球細胞損傷是糖尿病腎病的主要特征，但新近研究證實腎小管間質(zhì)損傷在糖尿病腎病中具有重要的意義，且腎小管間質(zhì)

3、病變并不繼發(fā)于腎小球病變，而是糖尿病腎病的早期和原始特征。腎小管上皮細胞損傷可導致腎小管重吸收和分泌功能異常，促進腎小管上皮細胞萎縮及腎間質(zhì)纖維化。最近研究證實肌醇耗竭在糖尿病腎病腎小管間質(zhì)損傷的過程中起著重要的作用，而腎臟特異性表達的肌醇加氧酶(Myo-inositol oxygenase，MIOX)主要表達在腎組織腎小管上皮細胞內(nèi)，是組織中肌醇代謝的關鍵調(diào)節(jié)酶。體外實驗表明高葡萄刺激可上調(diào)腎小管上皮細胞內(nèi)肌醇加氧酶的表達，并產(chǎn)生促進

4、活性氧(reactive oxygen species， ROS)生成及纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)表達的效應。基于以上分析，我們認為MIOX在糖尿病腎病患者腎組織內(nèi)表達上調(diào)，并可能與糖尿病腎病腎小管上皮細胞氧化損傷及間質(zhì)纖維化密切相關。故本試驗中我們通過檢測MIOX在糖尿病腎病患者腎活檢組織及血液、尿液中的表達，并分析其余臨床指標之間的相關性，旨在為進一步研究糖尿病腎病的發(fā)病機制及治療提供新的思路與靶點。
　　第

5、一章糖尿病腎病患者腎組織中MIOX的表達及其與臨床指標相關性分析
　　目的:觀察MIOX在糖尿病腎病患者腎組織中的表達，并分析其與臨床各指標之間的關系。
　　方法:隨機選取經(jīng)臨床和腎臟病理活檢確診為糖尿病腎病的患者15人及輕微病變的患者（原發(fā)性腎病）15人。采用HE，PASM，Masson，PAS染色觀察腎臟病理改變，免疫組化、免疫熒光檢測MIOX表達病變，并使用SPSS17.0分析糖尿病腎病患者腎組織內(nèi)MIOX相對表達程度

6、與臨床指標間的相關性。
　　結(jié)果:腎臟病理顯示糖尿病腎病患者腎活檢組織腎小球體積增大，部分出現(xiàn)結(jié)節(jié)性腎小球硬化，出現(xiàn)典型的Kimmelstiel-Wilson結(jié)節(jié)，腎小球系膜基質(zhì)的增生，基底膜的增厚、僵硬;腎小管片狀萎縮并部分代償性擴張，腎間質(zhì)的片狀纖維化改變。而對照組為輕微病變患者，腎小球部分基本正常，系膜細胞及系膜基質(zhì)都無明顯增生，腎小管間質(zhì)無明顯纖維化，血管無明顯異常。糖尿病腎病患者的腎小管間質(zhì)損傷評分明顯比對照組高。免疫組

7、化實驗結(jié)果提示:MIOX主要表達在腎小管上皮細胞胞漿內(nèi)。免疫熒光試驗結(jié)果提示:MIOX主要表達在腎小管上皮細胞的胞漿及腎間質(zhì)內(nèi)。與非糖尿病腎病輕微病變相比，糖尿病腎病患者腎小管細胞內(nèi)MIOX表達顯著上調(diào)(P＜0.05)。相關性分析表明MIOX表達強度與糖尿病腎病患者腎小管間質(zhì)損傷評分、血清肌酐、血糖、糖化血紅蛋白水平呈正相關。
　　結(jié)論:糖尿病腎病患者腎組織MIOX表達水平明顯上升，MIOX可能參與糖尿病腎病腎小管間質(zhì)損傷。

8、>　　第二章糖尿病腎病患者血液及尿液中MIOX的表達及其與臨床指標的相關性分析
　　目的:觀察糖尿病腎病患者血清及尿液中MIOX的表達，分析其與臨床指標的關系。
　　方法:隨機選取臨床診斷為糖尿病腎病患者30人，非糖尿病腎病慢性腎臟疾病患者30人，單純糖尿病患者30人，正常對照組30人。采用ELISA法檢測外周血及尿液中間的MIOX表達。
　　結(jié)果:MIOX檢測結(jié)果顯示:糖尿病腎病組，非糖尿病腎病組，糖尿病組，及正常對

9、照組血清MIOX的水平分別為:2050.4±160.7、1069.2±96.23、619.3±64.1、49.47±3.3pg/ml。糖尿病腎病組，非糖尿病腎病組，糖尿病組，及正常對照組尿液MIOX的水平分別為:2675.3±241.1、1427.2±146.3、775.0±80.3、73.5±4.8pg/ml。糖尿病腎病患者血，尿MIOX水平明顯高于非糖尿病腎病組、單純糖尿病患者組及正常對照組，差異具有統(tǒng)計學差異(p＜0.01)，相關