腎陽虛證誘喘小鼠的性激素與免疫因子(IL-4、IFN-γ)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的: 本研究之目的是探討腎陽虛證的微觀實質(zhì)及腎陽虛證誘喘小鼠性激素水平變化與免疫因子變化的相關(guān)性。中醫(yī)認(rèn)為：“腎陽虛”是哮病反復(fù)發(fā)作的內(nèi)在原因之一。根據(jù)“腎主生殖”的原理，近年來眾多研究資料顯示，腎陽虛證的實質(zhì)與性腺功能的異常密切相關(guān)，并存在性激素水平的改變。西醫(yī)認(rèn)為：支氣管哮喘的基本病理變化是氣道高反應(yīng)性炎癥，而免疫功能紊亂是導(dǎo)致這種病理變化的主要機(jī)制。目前，學(xué)界認(rèn)為支氣管哮喘屬中醫(yī)哮病范疇。本課題即將中醫(yī)哮病與西醫(yī)支氣管哮

2、喘病的內(nèi)在病理機(jī)制相結(jié)合，以腎陽虛證誘喘小鼠為模型探討實驗動物的性激素(T)變化與其免疫因子(IL-4、IFN—γ)變化的關(guān)系。 意義: 旨在進(jìn)一步探討腎陽虛證微觀實質(zhì)的內(nèi)容，尋求更多臨床相關(guān)疾病的治療手段，如支氣管哮喘。目前，盡管西醫(yī)對支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識已逐漸明晰，但支氣管哮喘的患病率和控制率并沒有呈下降趨勢，且死亡率仍在逐年上升。迄今糖皮質(zhì)激素仍是治療支氣管哮喘的最為有效的手段，但其副作用明顯，故許多學(xué)者都在

3、致力于尋求糖皮質(zhì)激素以外的治療手段。如果能夠證實腎陽虛證存在的性激素失衡與細(xì)胞免疫功能低下，兩者存在一定的相關(guān)性，那么運用補(bǔ)腎陽藥既能從中醫(yī)的角度改善腎陽虛的狀況，也能從西醫(yī)的角度達(dá)到調(diào)節(jié)免疫功能的目的，應(yīng)不失為一好的診療思路和手段。 方法: 將雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對照組、誘喘模型組、腎陽虛+誘喘模型組、腎陽虛+誘喘模型+BA防喘膠囊治療組、腎陽虛+誘喘模型+金匱腎氣丸治療組。模型組用摘除雙側(cè)睪丸及附睪法造腎陽虛模

4、型；再經(jīng)腹腔注射卵蛋白、氫氧化鋁混懸液致敏，霧化吸入卵蛋白生理鹽水溶液以激發(fā)哮喘。實驗過程中，觀察記錄各組小鼠的飲食、大小便、精神狀況、毛色、活動度及體重；并對末次誘喘30分鐘時的癥狀指數(shù)做統(tǒng)計分析。放射免疫法測定血清睪酮(T)，用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中白介素-4(IL-4)、γ—干擾素(IFN—γ)。同時對各實驗組小鼠肺組織進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察。 結(jié)果: 1．一般表現(xiàn)：腎陽虛各組造模后，小鼠逐漸出現(xiàn)畏寒喜暖、多尿、大便

5、稀溏、反應(yīng)遲鈍、蜷縮拱背、少動萎靡等陽虛證的表征。給予溫腎助陽類的復(fù)方中藥制劑者上述表征較之為輕；并發(fā)現(xiàn)腎陽虛動物模型更易誘發(fā)哮喘。 2．性激素檢測：與正常對照組比較，腎陽虛+誘喘模型組的T值顯著降低(P＜0.01)，而腎陽虛+誘喘模型+BA防喘膠囊組的T值則顯著高于腎陽虛+誘喘模型組(P＜0.01)；與腎陽虛+誘喘模型組比較，各治療組T值均高于對照組(P＜0.05)?？梢娔I陽虛+誘喘組小鼠的T值低下，而給予溫腎助陽類的復(fù)方中藥

6、制劑則可使其T值有所提高。 3．免疫因子檢測：檢測免疫因子IL-4后發(fā)現(xiàn)，與腎陽虛+誘喘模型組比較，各治療組IL-4的含量均顯著低于對照組(P＜0.01)。檢測免疫因子IFN—γ后發(fā)現(xiàn)，與腎陽虛+誘喘模型組比較，各治療組含量則高于對照組(P＜0.05)。 腎陽虛+誘喘模型組、腎陽虛+誘喘模型+BA防喘膠囊治療組、腎陽虛+誘喘模型+金匱腎氣丸治療組的IL-4與T水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.999，P=0.025)。腎陽虛+誘喘

7、模型組、腎陽虛+誘喘模型+BA防喘膠囊治療組、腎陽虛+誘喘模型+金匱腎氣丸治療組IFN—γ與T水平呈正相關(guān)(r=0.041，P=0.613)。故認(rèn)為中醫(yī)補(bǔ)腎助陽法及補(bǔ)腎助陽復(fù)方在調(diào)節(jié)性激素的同時，也能調(diào)節(jié)免疫因子失衡狀況，對控制哮喘的發(fā)作、改善哮喘發(fā)作癥狀均有作用。 4．肺組織病理形態(tài)學(xué)觀察：腎陽虛+誘喘模型小鼠較誘喘模型組小鼠肺組織病理學(xué)改變更明顯，給予溫腎平喘類中藥復(fù)方制劑的其病理改變程度較輕微。 結(jié)論: 1

8、．在以往相關(guān)研究的基礎(chǔ)上再次證明，腎陽虛證模型動物的形成與其機(jī)體內(nèi)性激素的水平異動相關(guān)。腎陽虛證的微觀證據(jù)之一，即性激素水平低下。 2．證明腎陽虛證確是中醫(yī)哮病(支氣管哮喘)反復(fù)發(fā)生的重要病理基礎(chǔ)之一。 3．進(jìn)一步證實模型動物體內(nèi)性激素的異動與其免疫因子的異動間存在相關(guān)性。且性激素應(yīng)為元激素，免疫因子則屬其下級因子。故根據(jù)中醫(yī)“治病求本”的原理，利用二者間的聯(lián)動關(guān)系，在糾正哮喘患者體內(nèi)性激素異常和使之回復(fù)至正常水平的前提