洛伐他汀和羅格列酮對單核-巨噬源性泡沫細胞ABCA1蛋白的干預.pdf

1、目的：以冠心病ACS患者外周血單核細胞為研究對象，探討藥物洛伐他汀、羅格列酮對其ABCAl蛋白表達的影響。 方法：1、一次性密度梯度超速離心法分離人血清脂蛋白，獲取LDL；用Cu2+(15umol/L)氧化法獲得氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)并鑒定；2、培養(yǎng)THP-1細胞；3、160nmol/L的佛波脂(PAM)誘導THP-1細胞成巨噬細胞，巨噬細胞與ox-LDL孵育成泡沫細胞，建立泡沫細胞模型；4、流式細胞技術檢測載脂蛋白

2、A-I、洛伐他汀、羅格列酮對THP-1源性泡沫細胞ABCAl蛋白表達的影響；5、洛伐他汀、羅格列酮干預對ABCAl介導的THP-1細胞源性泡沫細胞膽固醇逆向轉運過程中TNF α、IL-6分泌的干預(ELJSA法)；6、密度梯度法分離冠心病ACS患者外周血單個核細胞，獲得單核細胞(PBMC)；7、流式細胞技術檢測洛伐他汀和羅格列酮對冠心病ACS患者外周血單核細胞ABCA1蛋白表達的干預。 結果：1、洛伐他汀與羅格列酮可使THP-1

3、源性泡沫細胞.ABCA1蛋白表達增加。2、ApoA-I組THP-1細胞源性泡沫細胞內(nèi)膽固醇含量隨ApoA-I濃度和孵育時間呈濃度和時間依賴性降低。3、APOA-I組與ABCA1單克隆抗體預處理+APOA-I組比較，泡沫細胞內(nèi)膽固醇含量降低，差異有顯著性，而ABCA1單克隆抗體預處理+APOA-I組較對照組比較，細胞內(nèi)膽固醇含量未減少。4、洛伐他汀組(或羅格列酮組)與對照組和ABCA1單克隆抗體預處理+APOA-I組泡沫細胞內(nèi)膽固醇含量無

4、明顯差異，而洛伐他汀(或羅格列酮)+APOA-I組較洛伐他汀組(或羅格列酮組)顯著降低，洛伐他汀(或羅格列酮)+APOA-I組較ABCA1單克隆抗體預處理+洛伐他汀(或羅格列酮)+APOA-I組明顯降低。5、ox-LDL組(泡沫細胞)TNF α、IL-6分泌較對照組(巨噬細胞)明顯增加，ApoA-I+ox-LDL組、洛伐他汀(或羅格列酮)+ox-LDL組、洛伐他汀(或羅格列酮)+ApoA-I+ox-LDL組TNFα、IL-6分泌較ox-

5、LDL組顯著減少，而洛伐他汀(或羅格列酮)十ApoA-I+ox-LDL組較洛伐他汀(或羅格列酮)+ox-LDL組TNFα、IL-6的分泌進一步降低。 6、羅格列酮可使冠心病ACS患者外周血單核細胞ABCA1蛋白表達呈濃度和時間依賴性升高，而洛伐他汀對此未見明顯影響。 結論：1、APOA-I蛋白使THP-1源性泡沫細胞內(nèi)膽固醇含量呈濃度和時間依賴性降低，提示APOA-I是介導THP-1源性泡沫細胞RCT的重要蛋白。2、ApoA-I

6、需協(xié)同ABCA1蛋白方能介導膽固醇逆向轉運。3、泡沫細胞形成過程炎癥反應活躍，RCT可抑制炎癥反應，洛伐他汀和羅格列酮進一步抑制該炎癥反應，推測可能與洛伐他汀和羅格列酮促進RCT有關。4、洛伐他汀可促進THP-1源性泡沫細胞ABCAl蛋白表達，但對ACS患者PBMC ABCA1蛋白表達無明顯影響，提示洛伐他汀誘導ABCA1蛋白的表達具有細胞選擇性，推測洛伐他汀只能促進THP-1源性泡沫細胞RCT。5、羅格列酮可促進THP-1源性泡沫細胞