α-硫辛酸對(duì)糖尿病大鼠下丘腦及骨骼肌組織AMPK表達(dá)及活性的影響.pdf

1、目的：本研究旨在通過觀察α-硫辛酸對(duì)糖尿病大鼠腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的影響，探討其對(duì)不同組織AMPK信號(hào)調(diào)節(jié)途徑的調(diào)節(jié)作用以及在糖尿病代謝紊亂中的作用，以期為糖尿病及肥胖等代謝性疾病的防治提供新的作用靶點(diǎn)。
　　方法：健康雄性Wistar大鼠50只，體重180-200g，適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后隨機(jī)分為對(duì)照組(NC)15只，和實(shí)驗(yàn)組35只，對(duì)照組繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組改用高脂飼料喂養(yǎng)，4w后，禁食12h，將STZ溶于0.1mol

2、/L枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液(pH4.2)溶液中，配成濃度為1％的溶液，單次腹腔注射30mg/kg，對(duì)照組給予等量的枸櫞酸一枸櫞酸鈉緩沖液腹腔注射，72h后尾靜脈測(cè)血糖，血糖>16.7mmol/L為造模成功，成模者納入本實(shí)驗(yàn)，繼續(xù)高脂飲食4w后隨機(jī)分為2組，即α-硫辛酸干預(yù)組(LA)、糖尿病組(DC)，每組各15只，分別給予α-硫辛酸120mg/kg.d，生理鹽水2ml/d4w，實(shí)驗(yàn)期間，動(dòng)物自由攝食和飲水。每周測(cè)一次血糖和體重。實(shí)驗(yàn)第1

3、2w末，禁食12h后應(yīng)用戊巴比妥鈉麻醉大鼠，開胸，下腔靜脈取血備測(cè)血脂、血糖；取出大鼠下丘腦、骨骼肌液氮速凍，后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存?zhèn)錅y(cè)。生化指標(biāo)由本院生化室全自動(dòng)生化分析儀完成，AMPKα和磷酸化AMPKα(Ph-AMPKα)應(yīng)用免疫蛋白印記(western blot)法檢測(cè)，AMPKα、TRX、TXNIP的mRNA水平應(yīng)用RT-PCR定量，MDA、T-AOC的水平應(yīng)用比色法檢測(cè)。
　　結(jié)果：①DC組大鼠血糖、TG、TC、LDL

4、水平顯著高于NC組，而HDL水平顯著下降(P<0.05)；α-硫辛酸干預(yù)后大鼠血糖、TG、TC、LDL水平均較DC組顯著下降，而HDL顯著升高(P<0.05)；DC組較NC組大鼠體重增長(zhǎng)率減低(P<0.05)；與DC組比較，α-硫辛酸干預(yù)組大鼠體重增長(zhǎng)率減低(P<0.05)。②與NC組比較，DC組骨骼肌及下丘腦內(nèi)AMPKα及Ph-AMPKα表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)，α-硫辛酸干預(yù)組大鼠骨骼肌內(nèi)AMPKα及Ph-AMPKα較DC組

5、顯著升高(P<0.05)，而下丘腦內(nèi)AMPKα及Ph-AMPKα水平顯著降低(P<0.05)。③與NC組比較，DC組和α-硫辛酸干預(yù)組骨骼肌及下丘腦內(nèi)AMPKα2mRNA表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)；與DC組比較，α-硫辛酸干預(yù)組大鼠骨骼肌內(nèi)AMPKα2mRNA水平顯著升高(P<0.05)，而下丘腦內(nèi)AMPKα2mRNA水平顯著降低(P<0.05)；DC組下丘腦內(nèi)TRX-1mRNA及TXNIPmRNA水平較NC組明顯升高(P<0.0

6、5)，與DC組比較，α-硫辛酸干預(yù)組TRX-1mRNA及TXNIPmRNA水平顯著升高(P<0.05)④與NC組比較，DC組肝下丘腦MDA水平顯著升高(P<0.05)，而T-AOC水平顯著降低(P<0.05)；α-硫辛酸干預(yù)組MDA水平較DC組顯著下降(P<0.05)，而T-AOC水平顯著升高(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.α-硫辛酸對(duì)外周組織和中樞組織的AMPK發(fā)揮不同的調(diào)節(jié)作用，它可以上調(diào)骨骼肌AMPK及Ph-A