α-硫辛酸對(duì)糖尿病大鼠腸道痛覺(jué)敏感性的影響及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　1.初步闡明鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的成年糖尿病大鼠腸道痛覺(jué)敏感性改變及脊髓DRG神經(jīng)元（DRG）細(xì)胞中P2X3受體表達(dá)的變化特征。
　　2.探討α-硫辛酸（ALA）對(duì)糖尿病大鼠腸道痛覺(jué)敏感性的作用及其對(duì)P2X3受體表達(dá)的作用特征。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇成年雌性SD大鼠，應(yīng)用STZ65mg/kg腹腔注射誘導(dǎo)糖尿病模型。分組：將SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（CON），糖尿病組（STZ），糖尿病生理

2、鹽水處理組（STZ+NS）及糖尿病α-硫辛酸處理組（STZ+ALA）。運(yùn)用腹壁撤退反射（AWR）評(píng)分檢測(cè)大鼠在不同的結(jié)直腸充氣壓力下疼痛反應(yīng)。
　　2.應(yīng)用DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate）熒光染料直結(jié)腸注射逆行標(biāo)記直結(jié)腸投射的脊髓DRG神經(jīng)元細(xì)胞后，利用細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，檢測(cè)DRG神經(jīng)元興奮性及ATP電流密度。
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3、.使用Western Blotting技術(shù)檢測(cè)糖尿病大鼠直結(jié)腸特異性DRG神經(jīng)元細(xì)胞中P2X3受體表達(dá)量的改變。
　　結(jié)果：
　　1.STZ腹腔注射后1周起，大鼠血糖顯著升高，并伴體重不增（p<0.01）。
　　2. STZ注射后2-8周，糖尿病大鼠出現(xiàn)腸道痛敏（p<0.05），腹腔注射抗氧化劑ALA能明顯緩解糖尿病大鼠腸道痛敏。
　　3.糖尿病大鼠直結(jié)腸特異性DRG神經(jīng)元細(xì)胞興奮性及ATP電流密度顯著增加，給予

4、腹腔注射ALA一周后，神經(jīng)元興奮性明顯及ATP電流密度下降。
　　4.糖尿病大鼠直結(jié)腸特異性DRG神經(jīng)元細(xì)胞中P2X3受體表達(dá)量顯著高于對(duì)照組（p<0.01），而給予ALA腹腔注射一周后，P2X3受體蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（p<0.01）。
　　結(jié)論：
　　STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠腸道特異性DRG節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞中P2X3受體的表達(dá)量顯著上調(diào)，細(xì)胞興奮性增加，介導(dǎo)了糖尿病大鼠腸道痛覺(jué)過(guò)敏?？寡趸瘎│?硫辛酸能從分子水平阻斷上述病理