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1、目的:1.評(píng)價(jià)導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)(hybriMax)在宮頸人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測(cè)及宮頸病變?cè)\斷中的應(yīng)用價(jià)值;2.了解不同級(jí)別宮頸病變患者常見HPV感染基因型(又稱亞型);3.評(píng)價(jià)最常見HPV亞型發(fā)生宮頸病變的風(fēng)險(xiǎn);4.判斷多重感染與宮頸病變程度的關(guān)系。 方法:1.在中日友好醫(yī)院婦產(chǎn)科行宮頸癌篩查女性4200例中,選取細(xì)胞學(xué)異常者253例及細(xì)胞學(xué)正常以往無宮頸病變史者57例,采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行宮頸細(xì)胞HPV6
2、、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304(81)等21種亞型的分型檢測(cè),同時(shí)用雜交捕獲二代(HC-Ⅱ)進(jìn)行13種(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)高危型HPV的檢測(cè),對(duì)兩者結(jié)果不符合的標(biāo)本進(jìn)行基因測(cè)序;對(duì)上述患者中的101例宮頸組織標(biāo)本進(jìn)行HPV16/18原位雜交;比較不同方法檢測(cè)結(jié)果的一致性。2.在原基
3、礎(chǔ)上擴(kuò)大樣本,自7520例宮頸癌篩查女性中選取異常者共453例,正常者共138例,按組織病理結(jié)果分為慢性炎癥組、宮頸濕疣組、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組、宮頸癌組。對(duì)上述研究對(duì)象用HybriMax法進(jìn)行21種HPV亞型的分型檢測(cè),計(jì)算各基因型在不同病變類型中的陽(yáng)性率,常見基因型發(fā)生CIN的危險(xiǎn)度比值比(OR)及多重感染在不同病變類型中的比例。 結(jié)果:1.HybriMax與HC-Ⅱ兩種方法對(duì)13種高危型HPV感染的檢出結(jié)果
4、一致性良好,總符合率92.3%,宮頸癌組符合率100%;Kappa指數(shù)(KI)總體為0.796,正常組0.766,炎癥組0.768,宮頸濕疣組0.791,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ組分別為0.654,0.478,1.0,一致性好。結(jié)果不一致標(biāo)本測(cè)序結(jié)果60%支持HybriMax,28%支持HC-Ⅱ。2.HybriMax對(duì)宮頸病變?cè)\斷的靈敏度與HC-Ⅱ無差異。3.HybriMax與HPV16/18亞型原位雜交檢測(cè)結(jié)果符合率為89.1%,KI=0.7
5、76。4.用導(dǎo)流雜交法檢測(cè)的宮頸病變患者HPV陽(yáng)性率隨病變級(jí)別增加而增加,最常見的基因型為16、18、52、58、33、31。5.HPV16陽(yáng)性率隨病變級(jí)別的增加迅速上升,HPV18在CINⅢ及宮頸癌組中的陽(yáng)性率明顯高于炎癥組、CINI、Ⅱ組。HPV52、58在CIN各組中的陽(yáng)性率均高于正常組和炎癥組,甚至宮頸癌組。最常見6種基因型發(fā)生CIN的OR值均大于1。6.宮頸病變患者多重感染的比例隨病變級(jí)別增加而增加,分別為正常組19%,炎癥組
6、35.8%,CINⅠ組45.9%、CINⅡ組54.9%、CINⅢ組59.5%。 結(jié)論:1.導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)與HC-Ⅱ及原位雜交檢測(cè)結(jié)果一致性良好,對(duì)宮頸病變的檢出率與HC-Ⅱ一致,所得分型結(jié)果與世界范圍的報(bào)道一致,對(duì)多重感染的檢出率高,因而是HPV分型檢測(cè)的理想方法。2.HPV16、18、52、58、33、31為宮頸病變患者最常見的6種感染亞型,前5種與宮頸癌患者一致。3.HPV16致病力強(qiáng),HPV18陽(yáng)性患者可能較少經(jīng)歷C
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