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文檔簡(jiǎn)介
1、【背景】非整倍體是最常見的染色體異常,可導(dǎo)致胚胎停育與自發(fā)流產(chǎn),是限制試管嬰兒成功率的重要原因之一。胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(preimplatation genetic screening,PGS)是篩選染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)正常的胚胎進(jìn)行移植,以此期望提高移植成功率與妊娠率。目前PGS技術(shù)主要包括:原位熒光雜交技術(shù)、比較基因組雜交以及微陣列比較基因組雜交和單核苷酸多態(tài)性芯片技術(shù)等,但各項(xiàng)技術(shù)均存在缺點(diǎn)。為了尋找一種更快速、全面檢測(cè)非整倍體的方
2、法,我們以二代測(cè)序技術(shù)為基礎(chǔ),嘗試一種新方法完成對(duì)單細(xì)胞21-三體的診斷,從而建立該技術(shù)平臺(tái)為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。
【目的】初步建立深度測(cè)序技術(shù)在單細(xì)胞水平診斷21三體的技術(shù)平臺(tái)。
【方法】采用深度測(cè)序技術(shù)對(duì)正常女性外周血DNA進(jìn)行檢測(cè),評(píng)估該方法檢測(cè)的穩(wěn)定性。對(duì)不同濃度DNA的21-三體樣本應(yīng)用多重置換擴(kuò)增方法進(jìn)行全基因組擴(kuò)增,對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行深度測(cè)序,評(píng)估該方法對(duì)21-三體診斷的可行性。利用深度測(cè)序技術(shù)對(duì)單細(xì)胞21-三
3、體樣本進(jìn)行檢測(cè),初步建立深度測(cè)序方法檢測(cè)單細(xì)胞-21三體的技術(shù)平臺(tái)。
【結(jié)果】
1.采用深度測(cè)序方法對(duì)14例樣本進(jìn)行檢測(cè),各染色體標(biāo)準(zhǔn)差均處于低水平,其中最大標(biāo)準(zhǔn)差為0.078。21-三體樣本21號(hào)染色體拷貝數(shù)是正常樣本21號(hào)染色體拷貝數(shù)的1.5倍,其余染色體與正常樣本相比未發(fā)現(xiàn)拷貝數(shù)的明顯異常。
2.cutoff值0.5、1、1.5分別代表單倍體、二倍體和三倍體,21-三體樣本測(cè)序結(jié)果顯示21號(hào)染色體cu
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