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1、目的:對(duì)益氣化瘀清熱方進(jìn)行拆方,通過(guò)觀察各類含藥血清對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)下體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(MsC)表達(dá)NF-κBp65、IκB-α mRNA和蛋白的影響,探討不同中藥治療系膜增生性腎小球腎炎(MsPGN)的作用強(qiáng)度以及益氣化瘀清熱方治療腎小球腎炎的作用機(jī)制。
方法:利用 LPS誘導(dǎo)體外培養(yǎng)大鼠 MsC增生,形成 MsC增生模型,將造模成功后的MsC隨機(jī)分為控制組、模型組、對(duì)照組、益氣組、化瘀組、清熱組、復(fù)方組、
2、雷公藤多甙組,分別加入各類含藥血清繼續(xù)培養(yǎng),采用 RT-P C R法檢測(cè)各類含藥血清對(duì)MsC表達(dá)NF-κBp65、IκB-αmRNA的影響,Western法檢測(cè)各類含藥血清對(duì)MsC表達(dá)NF-κBp65、IκB-α蛋白的影響。
結(jié)果:
1.各組含藥血清均可影響體外培養(yǎng)的MsC NF-κBp65、IκB-α表達(dá),與對(duì)照組、空白組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在下調(diào) NF-κBp65mRNA方面:與復(fù)方組比較:化瘀組、雷公藤組作用較
3、強(qiáng),益氣組、清熱組與復(fù)方組作用無(wú)明顯差異。
2.各組含藥血清均可上調(diào)IκB-αmRNA表達(dá),益氣、化瘀、清熱三組比較:清熱組作用大于化瘀組、益氣組,其中益氣組作用最弱,三者之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與雷公藤組比較:復(fù)方組作用較強(qiáng),清熱組與雷公藤組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
3.各組含藥血清均可下調(diào)體外培養(yǎng)的MsC表達(dá)N F-κBp65蛋白,與復(fù)方組比較:化瘀組、雷公藤組作用優(yōu)于復(fù)方組;益氣組、清熱組與復(fù)方組無(wú)明顯區(qū)別;益氣、
4、化瘀、清熱三組比較:化瘀組作用明顯強(qiáng)于益氣組、清熱組,但益氣組與清熱組之間無(wú)顯著性差異。
4.在上調(diào) IκB-α蛋白表達(dá)時(shí):各組含藥血清均可上調(diào) LPS刺激后的MsC表達(dá)IκB-α蛋白,其中復(fù)方組作用最強(qiáng),清熱組、雷公藤組次之,益氣組最弱,各組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:益氣化瘀清熱方及其拆方、雷公藤多苷均能影響體外培養(yǎng)的MsC表達(dá)N F-κBp65、IκB-α。在下調(diào)N F-κB表達(dá)方面,不同組的中藥比較,化
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