丹芍顆粒通過調(diào)節(jié)NF-κB-IκB及MMP-2的表達抑制系膜增生的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：研究不同劑量的丹芍顆粒含藥血清對脂多糖(LPS)誘導的系膜細胞增殖后NF-κB p65、IκB、MMP-2等因子的調(diào)控作用，探討不同劑量丹芍顆粒治療過敏性紫癜性腎炎的機制。
　　方法：體外培養(yǎng):LPS誘導大鼠系膜細胞(HBEH)增殖，采用不同劑量丹芍顆粒含藥血清進行干預(yù)，24小時后收集細胞，western blotting法測定NF-κB p65、IκB、MMP-2等因子的蛋白表達情況;PCR法測定NF-κB p65mRNA

2、的表達情況;各組細胞經(jīng)免疫熒光細胞化學染色法處理后，其MMP-2蛋白表達情況通過激光共聚焦顯微鏡觀察。
　　結(jié)果：1.Western blotting法顯示:LPS誘導HBEH細胞增殖后，NF-κB p65蛋白表達升高(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組NF-κB p65蛋白表達量下降(P＜0.05)。由此可知，含藥血清組能降低LPS誘導的HBEH細胞增殖后NF-κB p65蛋白的表達。2.Western blotti

3、ng法顯示:LPS誘導HBEH細胞增殖后，IκB蛋白表達下降(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組IκB蛋白表達量上升(P＜0.05)。由此可知，含藥血清組能增高LPS誘導的HBEH細胞增殖后IκB蛋白的表達。3.Western blotting法顯示:LPS誘導HBEH細胞增殖后，MMP-2蛋白表達升高（P＜0.05）;與LPS組相比較，低劑量含藥血清組MMP-2蛋白表達量下降(P＜0.05)。由此可知，低劑量含藥血清組能降

4、低LPS誘導的HBEH細胞增殖后MMP-2蛋白的表達。4.PCR法顯示:LPS誘導HBEH細胞增殖后，NF-κB p65mRNA表達升高(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組NF-κB p65mRNA表達量下降（P＜0.05）。由此可知，含藥血清組能降低LPS誘導的HBEH細胞增殖后NF-κB p65mRNA的表達。5.免疫熒光法顯示:正常組核內(nèi)幾乎不見熒光表達，提示正常組HBEH細胞核內(nèi)幾乎沒有MMP-2蛋白表達;LPS組細