納米介孔硅載七葉皂苷鈉對(duì)糞腸球菌的體外抗菌作用研究.pdf

1、目的:
　　分別比較氨基改性前后的介孔硅負(fù)載七葉皂苷鈉藥物（SA-SBA-15及SA-NH2-SBA-15）和氫氧化鈣(Ca(OH)2)在體外對(duì)糞腸球菌的抑菌、殺菌作用，分析其優(yōu)缺點(diǎn)，為新型根管封藥材料研發(fā)提供新思路。
　　方法:
　　1、直接購(gòu)買氨基改性前的介孔硅材料SBA-15，觀測(cè)其形態(tài)、紅外光譜圖像、吸附-脫附能力，用于載藥研究。
　　2、采用直接嫁接法制備氨基改性后的NH2-SBA-15，觀測(cè)其形態(tài)、紅

2、外光譜圖像、吸附-脫附能力。
　　3、再使用乙醇溶解-水浴超聲-電機(jī)攪拌法制備SA-NH2-SBA-15及SA-SBA-15，完成后檢測(cè)介孔硅藥物的形態(tài)、粒徑、載藥量等，比較兩者的緩釋特性。
　　4、采用液體稀釋法藥敏實(shí)驗(yàn)、MTT比色法測(cè)定SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2在體外對(duì)糞腸球菌的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC);采用液體擴(kuò)散法肉眼觀察不同濃度SA-NH2-SBA-15、S

3、A-SBA-15及Ca(OH)2在體外對(duì)糞腸球菌抑菌圈的大小，評(píng)價(jià)SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2的抑菌效果;制備3.5mg/mL的SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及4.0mg/mL的Ca(OH)2各2mL，加入菌液后于37℃厭氧環(huán)境下恒溫培養(yǎng)168小時(shí)，每隔24小時(shí)取0.1mL液體另作厭氧培養(yǎng)24小時(shí)，記錄菌落數(shù)，觀察7個(gè)不同時(shí)間SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2

4、的抑菌效果。所得結(jié)果使用SPSS18.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1、氨基改性后的NH2-SBA-15仍與改性前的SBA-15保持一致的孔道結(jié)構(gòu)，改性前后的介孔硅材料均適合裝載藥物;負(fù)載七葉皂苷鈉后，SA-NH2-SBA-15及SA-SBA-15仍有規(guī)則的孔道結(jié)構(gòu)，粒徑分布均勻。改性前的SBA-15的載藥量為18.01％，氨基改性后的NH2-SBA-15載藥量為27.72％，改性后的載藥量明顯高于改性前

5、，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);從不同時(shí)間的累計(jì)緩釋量看，在48到96小時(shí)，SA-NH2-SBA-15的累計(jì)緩釋量比SA-SBA-15低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，但前者的緩釋時(shí)間比后者長(zhǎng)。
　　2、液體稀釋法實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:SA-NH2-SBA-15的MIC為3.5mg/mL, MBC為4.0mg/mL; SA-SBA-15的MIC為3.5mg/mL,MBC為4.0mg/mL， Ca(OH)2的MIC為4.0mg/

6、mL，MBC為4.5mg/mL，MIC值與MTT比色法所得結(jié)果相同。
　　3、SA-NH2-SBA-15和SA-SBA-15藥物濃度在2.5mg/mL及以上時(shí)，以及Ca(OH)2濃度在3.0mg/mL及以上時(shí)，三者均對(duì)糞腸球菌有一定的抑制作用。
　　當(dāng)三組(SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15和Ca(OH)2組）濃度大于最低抑菌濃度時(shí)，各組組內(nèi)隨濃度增大，抑菌圈增大，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　

7、在一定的相同濃度下（4.0mg/mL組、4.5mg/mL組和5.0mg/mL組），三組藥物抑菌圈大小比較:SA-SBA-15＞SA-NH2-SBA-15＞ Ca(OH)2，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　4、3.5mg/mL的SA-NH2-SBA-15在24小時(shí)至144小時(shí)內(nèi)，各組內(nèi)菌落數(shù)隨時(shí)間增加而減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);3.5mg/mL的SA-SBA-15在24小時(shí)至96小時(shí)內(nèi)，各組內(nèi)菌落數(shù)隨時(shí)間

8、增加而減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);在72至168小時(shí)，SA-NH2-SBA-15與SA-SBA-15的菌落數(shù)明顯少于氫氧化鈣，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);在96小時(shí)后，SA-NH2-SBA-15的菌落數(shù)明顯少于SA-SBA-15，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);4.0mg/mL的氫氧化鈣在120小時(shí)前菌落數(shù)保持穩(wěn)定，在120小時(shí)后菌落數(shù)明顯增加。
　　結(jié)論:
　　1、改性前的介孔硅材料SBA-15與

9、改性后的NH2-SBA-15都具有裝載及緩釋藥物的能力，NH2-SBA-15的載藥能力、緩釋藥物的時(shí)間優(yōu)于SBA-15。
　　2、體外抗菌實(shí)驗(yàn)說(shuō)明，SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及氫氧化鈣對(duì)糞腸球菌具有一定的抗菌作用。SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15的抑菌效果優(yōu)于氫氧化鈣;
　　3、SA-NH2-SBA-15與SA-SBA-15對(duì)糞腸球菌的抑菌抗菌能力優(yōu)于氫氧化鈣，SA-NH2-SBA-15對(duì)糞