Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤預(yù)后及治療中的作用研究.pdf

1、[背景目的]
　　 軟骨肉瘤是常見惡性骨腫瘤之一。發(fā)病率約占骨原發(fā)性惡性腫瘤的20％，居骨肉瘤之后，列第2位。軟骨肉瘤相對其他腫瘤而言以細胞外基質(zhì)多、分裂細胞比例小、血管相對少為組織特點，因此軟骨肉瘤對化療和放療都有一定的抵抗。因此，臨床上手術(shù)大塊切除依然是軟骨肉瘤最主要的治療方法。但是術(shù)后復(fù)發(fā)率有20％之多，而且復(fù)發(fā)病例的惡性程度會逐漸增高。目前，因分子靶向治療具有特異性高、損傷小、毒副作用小的特點，已成為繼手術(shù)、放療和化療之

2、后的新的治療手段。因此，尋找可用于治療軟骨肉瘤的靶點對于軟骨肉瘤的治療具有十分重要的意義。
　　 Aurora Kinase A參與中心體的成熟、分離;紡錘體的組裝、穩(wěn)定;染色體的濃集、中板聚合和穩(wěn)定等多種有絲分裂事件，其過表達會引起中心體的擴增、多倍體的形成以及p53的缺失等。陸續(xù)有文獻報道多種惡性腫瘤中均發(fā)現(xiàn)有Aurora Kinase A的高表達。Aurora Kinase A已被證實為能引起惡性腫瘤發(fā)生的新的癌基因。

3、r>　　 Aurora Kinase B是一種染色體過客蛋白，在細胞內(nèi)與INCENP、BOREALIN、SURVIVIN等共同組成染色體過客蛋白復(fù)合物，在細胞有絲分裂中起著調(diào)節(jié)染色體精確分離、組蛋白修飾和胞質(zhì)分裂的作用，也被證實與腫瘤的發(fā)展有密切關(guān)系。并且，目前已有多項研究報道Aurora Kinase活性抑制劑有抑制腫瘤細胞生長的作用，并有多種抑制劑已經(jīng)進入臨床前期試驗。
　　 但是國內(nèi)外關(guān)于Aurora Kinase A、

4、B與軟骨肉瘤關(guān)系的研究尚未見報道。為了探索Aurora Kinase A、B在人軟骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，為以AuroraKinase A、B為靶點進行靶向治療提供實驗依據(jù)，本論文從以下兩個方面進行了研究:
　　 1.Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤組織中的表達及臨床意義;
　　 2.AuroraKinase A基因沉默對軟骨肉瘤細胞株sw1353細胞增殖能力的影響。
　　 [實驗方法]
　　

5、 1.收集山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2005年1月1日至2011年6月30日期間的手術(shù)切除后經(jīng)病理診斷為軟骨肉瘤標本72例，同時收集整理所選病例的臨床資料，并對入選病例進行電話隨訪。另外選取42例軟骨瘤作為對照。采用免疫組織化學(xué)SP法，檢測軟骨肉瘤和軟骨瘤組織中Aurora Kinase A、B的表達，評價Aurora Kinase A、B的表達與軟骨肉瘤臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。
　　 2.檢測Aurora Kinase A在軟骨肉瘤

6、SW1353細胞中的表達，利用RNA干擾技術(shù)沉默SW1353細胞中Aurora Kinase A的表達，采用MTT法檢測Aurora KinaseA基因沉默對SW1353細胞增殖能力的影響。
　　 [實驗結(jié)果]
　　 1.Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤組織中的表達明顯高于在軟骨瘤組織中的表達（P＜0.01）;Aurora Kinase A、B在普通型中高級別軟骨肉瘤中的表達高于低級別組的表達(P＜0.01)

7、; Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤復(fù)發(fā)組和轉(zhuǎn)移組中的表達均高于非復(fù)發(fā)組非轉(zhuǎn)移組，其表達亦有顯著性差異(P＜0.05);
　　 2.生存分析結(jié)果顯示Aurora Kinase A陽性表達組生存率低于Aurora Kinase A陰性組，具有顯著性差異(P＜0.05)。多因素Cox風險回歸分析顯示AuroraKinase A高表達為影響預(yù)后的獨立危險因子(HR=11.263，95％CI:2.317-54.748，P=0