改性殼聚糖聯(lián)合甲基潑尼松龍對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)的相關(guān)研究.pdf

1、目的:
　　研究表明改性殼聚糖是一種天然聚陽(yáng)離子生物多糖，具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性，已廣泛應(yīng)用于腹腔術(shù)后的防粘連治療，也在神經(jīng)修復(fù)、皮膚修復(fù)、骨及軟骨修復(fù)等方面表現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。甲基潑尼松龍是一種中效糖皮質(zhì)激素，具有抗炎、免疫抑制以及改善損傷神經(jīng)附近微環(huán)境的作用，有研究證實(shí)在周?chē)窠?jīng)損傷后應(yīng)用甲基潑尼松龍可促進(jìn)神經(jīng)再生。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用改性殼聚糖與甲基潑尼松龍，觀察對(duì)SD大鼠坐骨神經(jīng)離斷吻合術(shù)后神經(jīng)再生修復(fù)所起的作

2、用，探索有效、安全的改善周?chē)窠?jīng)損傷再生與修復(fù)的新方法。
　　方法:
　　6周齡SD(Sprague-Dawley)大鼠60只，雌雄不限，質(zhì)量160-200 g，隨機(jī)分為5組，每組12只:A改性殼聚糖組，B甲基潑尼松龍組，C改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組，D生理鹽水對(duì)照組，E假手術(shù)組。ABCD四組SD大鼠于坐骨結(jié)節(jié)與股骨大轉(zhuǎn)子連線和坐骨神經(jīng)相交處用手術(shù)刀片切斷坐骨神經(jīng)，并在手術(shù)顯微鏡下，將切斷的坐骨神經(jīng)用9-0帶線縫合針

3、行神經(jīng)外膜端端縫合，神經(jīng)外膜縫合4-6針。顯微吻合后立即根據(jù)分組不同于神經(jīng)吻合口周?chē)⑷氩煌幬镞M(jìn)行干預(yù)（A組改性殼聚糖1ml;B組甲基潑尼松龍10mg;C組改性殼聚糖1ml+甲基潑尼松龍10mg;D組生理鹽水1ml），E組假手術(shù)組游離坐骨神經(jīng)后不切斷。術(shù)后每組大鼠縫合切口，肌注慶大霉素，預(yù)防感染。術(shù)后每天觀察SD大鼠展爪反射恢復(fù)、右下肢腫脹、皮膚潰瘍、足趾脫落等一般情況，并于術(shù)后4，8，12周測(cè)定坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度、腓腸肌濕質(zhì)量殘存率、

4、腓腸肌細(xì)胞直徑及截面積，坐骨神經(jīng)粘連，光鏡及透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)組織學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　實(shí)驗(yàn)SD大鼠60只，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)大鼠意外死亡及術(shù)后感染發(fā)生，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)數(shù)據(jù)脫失。所有大鼠術(shù)后8天右側(cè)股后部皮膚傷口全部愈合。ABCD四組坐骨神經(jīng)切斷并吻合大鼠，術(shù)后麻醉復(fù)蘇后即出現(xiàn)右下肢癱瘓癥狀，并逐漸出現(xiàn)右下肢失神經(jīng)性皮膚營(yíng)養(yǎng)不良表現(xiàn)。A組第25天開(kāi)始展爪反射恢復(fù)，第32天全部恢復(fù)。B組第25天開(kāi)始恢復(fù)，第33天全部恢復(fù)。C組于

5、第22天出現(xiàn)恢復(fù)，第28大全部恢復(fù)。D組第26天開(kāi)始恢復(fù)，第38天全部恢復(fù)。E組術(shù)后展爪反射未消失。結(jié)果顯示C組較A組B組早，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），A組與B組相比，展爪反射恢復(fù)時(shí)間類(lèi)似，相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。術(shù)后第4周、8周、12周，在體測(cè)量坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度:在3個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)中，E組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度最快，ABCD四組明顯慢于E組。D組生理鹽水對(duì)照組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度最慢。C組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度快于A組與B組及D組，具有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。A組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度稍稍快于B組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。術(shù)后第4周、8周、12周，測(cè)定腓腸肌濕質(zhì)量殘存率表明:隨著術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)，ABCD四組大鼠腓腸肌濕質(zhì)量殘存率逐漸下降，其中D組下降最快。E組濕質(zhì)量殘存率明顯高于ABCD四組，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。C組與ABD組相比，濕質(zhì)量殘存率下降明顯較慢，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周，測(cè)量腓腸肌直徑及計(jì)算截面積顯示:隨著

7、術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)，ABCD四組腓腸肌肌細(xì)胞直徑及截面積進(jìn)行性減小;與E組相比較，D組直徑及截面積減小最多（P＜0.05），在同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)上，A組、B組及C組腓腸肌肌細(xì)胞直徑及截面積減小較少。C組與ABD三組相比，直徑及截面積減小明顯較小，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周，觀察坐骨神經(jīng)粘連情況表明:D組坐骨神經(jīng)與周?chē)M織粘連較重，不易分離。E組亦存在較重粘連。A組、B組及C組粘連情況較D組及E組為輕。在ABC三組中

8、，C組粘連情況相對(duì)較輕，相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。術(shù)后12周時(shí)電鏡觀察:E組假手術(shù)組可見(jiàn)神經(jīng)纖維無(wú)明顯分散，排列有序，髓鞘境界清晰，未見(jiàn)明顯髓鞘脫失。D組生理鹽水對(duì)照組可見(jiàn)神經(jīng)纖維、樹(shù)突、軸突及細(xì)胞器均嚴(yán)重變性及壞死，膜結(jié)構(gòu)不清，多見(jiàn)空泡狀改變，髓鞘排列雜亂、相互融合、溶解，髓鞘完整性嚴(yán)重破壞。C組改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組可見(jiàn)神經(jīng)纖維束及樹(shù)突、軸突、胞體等結(jié)構(gòu)，細(xì)胞膜及細(xì)胞器均較清楚，纖維排列稍紊亂，胞體內(nèi)膜結(jié)構(gòu)及形

9、態(tài)較正常稍差，部分胞體輕度水腫及變性。A組改性殼聚糖組可見(jiàn)神經(jīng)纖維排列尚有序，未見(jiàn)明顯變性，部分細(xì)胞器變性，部分膜結(jié)構(gòu)不清，欠光滑，細(xì)胞器變性變形，可見(jiàn)空泡變，部分染色質(zhì)凝集固縮，但優(yōu)于E組假手術(shù)組及D組生理鹽水對(duì)照組。B組甲基潑尼松龍組鏡下所見(jiàn)類(lèi)似于改性殼聚糖組。
　　結(jié)論:
　　1.改性殼聚糖、甲基潑尼松龍均能防治周?chē)窠?jīng)損傷后吻合口附近粘連和瘢痕增生。改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合使用后，明顯減少粘連和瘢痕發(fā)生率。