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文檔簡介
1、目的:在目前針灸治療中風(fēng)病的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究基礎(chǔ)制備膠原川芎嗪緩釋劑,研究在大椎、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴位埋藥對局灶性腦缺血再灌注大鼠腦梗死體積的影響以及穴位埋藥對基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制劑-1(TIMP-1)的調(diào)節(jié)作用。 方法: 選用健康SD大鼠160只,隨機分為6組,正常組10只,假手術(shù)組30只(24h組、72h組、120h組各10只),模型組30只(24h組、72h組、120h組各10只),腹腔注射組
2、30只(24h組、72h組、120h組各10只),電針組30只(24h組、72h組、120h組各10只),穴位埋藥組30只(24h組、72h組、120h組各10只)。采用大腦中動脈線栓法(MCAO)制備缺血再灌模型,以膠原川芎嗪制備的緩釋劑(藥線)在大椎、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴位埋藥。每組中分別取4只大鼠直接斷頭取新鮮腦組織作TTC染色處理;另外6只大鼠以10%水合氯醛麻醉,4℃4%多聚甲醛200ml(含0.1%DEPC)心臟灌注,迅速取腦,在視交
3、叉平面前后2mm處將腦冠狀切開,留取中間部分置于4℃4%多聚甲醛固定液中過夜,將固定后的腦組織進(jìn)行石蠟包埋。分別運用免疫組化法檢測缺血皮質(zhì)區(qū)MMP-9與TIMP-1含量的變化以及穴位埋藥對上述指標(biāo)的影響,采用HPIAS-1000計算機高清晰彩色圖像分析儀對切片進(jìn)行圖像分析,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果: 1.大腦中動脈缺血再灌注可明顯損害大鼠的正常行為活動。腹腔注射、電針、穴位埋藥組大鼠神經(jīng)體征均有明顯改善,與模型組比較有
4、顯著性差異(P<0.05,P<0.01),其中穴位埋藥能明顯改善大鼠神經(jīng)體征(與腹腔注射組比較,P<0.01;與電針組比較,P<0.05)。 2.腦缺血再灌后經(jīng)TTC染色可見缺血區(qū)有明顯的梗死灶,腹腔注射、電針、穴位埋藥均能減輕缺血再灌后腦梗死體積,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01),其中穴位埋藥能明顯縮小腦梗死體積(與腹腔注射組比較,P<0.01;與電針組比較,P<0.05)。 3.免疫組化結(jié)果顯示腦缺血再灌后缺
5、血區(qū)腦組織中MMP-9表達(dá)增高、TIMP-1表達(dá)降低,腹腔注射、電針均能下調(diào)MMP-9表達(dá)、上調(diào)TIMP-1的表達(dá),與模型組比較有顯著性差異(P<0.05),其中穴位埋藥24h對MMP-9、TIMP-1的調(diào)節(jié)作用并不明顯(與模型組比較,P>0.05;與腹腔注射組比較,P>0.05),其優(yōu)勢作用表現(xiàn)在72h和120h(與腹腔注射組、電針組比較,P<0.05)。 結(jié)論:大鼠局灶性腦缺血再灌損傷后缺血區(qū)腦組織中MMP-9表達(dá)增高、TI
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