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文檔簡介
1、背景:近年來隨著影像學(xué)技術(shù)的發(fā)展,腦白質(zhì)損傷(White matter lesions,WML)在臨床上越來越多地被檢出,目前大量的研究表明腦白質(zhì)損傷與認(rèn)知功能障礙、癡呆有著密切聯(lián)系。隨著全球人口進(jìn)入老齡化的社會(huì),認(rèn)知功能障礙、癡呆給家庭、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)帶來了許多嚴(yán)重問題。因此研究腦白質(zhì)損傷的機(jī)制,為尋求有效的保護(hù)和治療措施提供新的思路,顯得十分有意義。目前的研究表明,缺血是造成腦白質(zhì)損傷的重要原因,但具體的機(jī)制仍未十分明確。
2、 目的:⑴采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈分期永久結(jié)扎法建立大鼠慢性全腦低灌注模型,觀察低灌注下大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)的改變,探討該法是否適用于慢性缺血性腦白質(zhì)損傷的實(shí)驗(yàn)研究。⑵檢測大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)基質(zhì)金屬蛋白酶2,3和7(Matrix metalloproteinase-2,3 and7,MMP-2,3 and7)的表達(dá)變化并探討其意義。
方法:①清潔級(jí)wistar雄性大鼠60只,隨機(jī)分為假手術(shù)組1組和模型組3組(20天組、40天組、60天組
3、),每組各15只,模型組行雙側(cè)頸總動(dòng)脈分期永久結(jié)扎術(shù)制備慢性全腦低灌注模型。②透射電鏡觀察側(cè)腦室旁白質(zhì)超微結(jié)構(gòu)變化,神經(jīng)髓鞘固藍(lán)染色法(Luxol fastblue staining,LFB staining)對(duì)腦組織進(jìn)行髓鞘染色,觀察白質(zhì)的病理改變。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫組化染色觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞的變化。免疫印跡法檢測側(cè)腦室旁白質(zhì)髓鞘堿性蛋白(Myelinbasi
4、c protein,MBP)的含量變化。③免疫組化染色法和免疫印跡法分別定位和半定量檢測大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)MMP-2,3和7的表達(dá)變化。
結(jié)果:⑴電鏡觀察到模型20天組大鼠胼胝體和內(nèi)囊有髓纖維髓鞘發(fā)生變形、板層結(jié)構(gòu)疏松、崩潰等脫髓鞘改變,血管旁明顯水腫現(xiàn)象,而假手術(shù)組未見明顯變化。神經(jīng)髓鞘固藍(lán)染色可見各模型組胼胝體和內(nèi)囊出現(xiàn)不同程度脫髓鞘、空泡形成等白質(zhì)損傷改變,而假手術(shù)組未見明顯變化。⑵GFAP免疫組化染色:各模型組胼胝體
5、和內(nèi)囊見星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體肥大、突觸增粗、數(shù)量增多。經(jīng)半定量分析,各模型組GFAP表達(dá)隨低灌注時(shí)間延長逐漸增多,較假手術(shù)組差異均有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫印跡法檢測MBP水平含量:隨低灌注時(shí)間延長,各模型組胼胝體和內(nèi)囊MBP水平逐漸下降,較假手術(shù)組差異均有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑶各模型組胼胝體和內(nèi)囊MMP-2,3和7表達(dá)均較假手術(shù)組增多,MMP-2,3和7表達(dá)與側(cè)腦室旁白質(zhì)損傷呈明顯正相關(guān)。
結(jié)論:①分期永久結(jié)扎wistar大鼠雙側(cè)頸
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